Getico Gelsafe DNA/RNA 凝胶染料

Getico Gelsafe DNA/RNA Gel Stain 是一种高度敏感的染料,用于在琼脂糖或丙烯酰胺凝胶中染色DNA或者RNA。染料经过专门设计,使其无法穿透细胞膜,是一种危害很小的溴化乙锭替代品,可利用蓝光或紫外线激发。市场上其他供应商的染料,如GoldView染料,其实都是致癌的毒性染料,毒性比EB还要高。比如GoldView,其实就是比EB更毒的吖啶橙,一种高诱变性及致癌性的剧毒物质,反而被宣传成了无毒的染料,切记不可以作为无毒染料使用。本品对比市场上另一种核酸染料-Gel red和Gel green, 灵敏度差不多,但是Gelred和Gel green对大片段影响很大,会导致大片段迁移拖尾,弯曲,弥散等,而我们的Gelsafe就没有这种情况。

650
规格: 121001-0.5ml
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产品名称产品编号规格价格(元)
Gelsafe1210010.5ml650


产品描述


Getico Gelsafe DNA/RNA Gel Stain 是一种高度敏感的染料,用于在琼脂糖或丙烯酰胺凝胶中染色DNA或者RNA。染料经过专门设计,使其无法穿透细胞膜,是一种危害很小的溴化乙锭替代品,可利用蓝光或紫外线激发。

市场上其他供应商的染料,如GoldView染料,其实都是致癌的毒性染料,毒性比EB还要高。比如GoldView,其实就是比EB更毒的吖啶橙,一种高诱变性及致癌性的剧毒物质,反而被宣传成了无毒的染料,切记不可以作为无毒染料使用。

本品对比市场上另一种核酸染料-Gel red和Gel green, 灵敏度差不多,但是Gelred和Gel green对大片段影响很大,会导致大片段迁移拖尾,弯曲,弥散等,而我们的Gelsafe就没有这种情况。


• 减少您接触高度致突变溴化乙锭和有害紫外线的机会

• 通过减少非特异性背景荧光来提高灵敏度

• 代替溴化乙锭用于所有染色应用,包括 DNA染色,RNA 染色

 

比溴化乙锭安全很多

Getico Gelsafe凝胶染色剂经过专门配制,并在一系列毒性测试和动物实验中进行了评估,结果表明,与溴化乙锭相比,它的致突变性更低且更安全。


出色的灵敏度

Getico Gelsafe染料在紫外激发或蓝光激发的核酸可视化和文档应用中提供出色的灵敏度。当与核酸结合时,染料在~280和~502 nm处具有最大荧光激发能量,在~530 nm处具有最大发射能量。此外,当与蓝光照射一起使用时,Getico Gelsafe染料的背景荧光比用紫外光照射的溴化乙锭染色凝胶要少。

 

使用方便

Getico Gelsafe染料以10,000X 浓缩物的形式提供,可以像溴化乙锭溶液一样使用。Getico Gelsafe染料可混入琼脂糖凝胶中进行电泳染色,或者凝胶可在电泳后在Getico Gelsafe染料溶液中孵育。Getico Gelsafe染色剂可以在室温下保存,需要进行避光保存。

 

产品对比

名称

毒性*

灵敏度*

清晰度*

适合样品

使用方式

备注

EB

9.5

7

8

DNA,RNA.ssDNA

预染,后染

极难讲解,毒性大,环境污染大

GoldView

10

5

5

DNA,RNA

预染,后染

毒性比EB还大

GelRed

0

8

6

DNA,RNA.ssDNA

后染

大于1000bp的片段会有明显的拖尾,弥散

SYBR Safe

1

7

8

DNA,RNA.ssDNA

预染,后染

安全性良好,条带较清晰

Getico GelSafe

0

9

10

DNA,RNA.ssDNA

预染,后染

安全性很好,条带清晰

 *备注:数字越大,表示相应的毒性/灵敏度/清晰度越高。



1. Getico Gelsafe DNA/RNA Gel Stain 适用于哪些样本类型?
Getico Gelsafe Gel Stain 适用于多种核酸样本类型,可对双链 DNA(dsDNA)、单链 DNA(ssDNA)以及 RNA 进行染色检测 。无论是通过 PCR 扩增得到的 DNA 片段,还是从细胞或组织中提取的基因组 DNA、RNA,亦或是经酶切等分子生物学操作后的核酸产物,都能使用该染色剂进行染色 。在琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶电泳实验中,它能有效与核酸结合并发出荧光,帮助研究人员直观地观察核酸的条带分布,从而判断核酸的大小、纯度和浓度等信息 。
2. 试剂盒的储存条件和保质期是怎样的?
该染色剂在常温下即可短期储存,方便日常实验取用 。若需长期保存,建议储存于 - 20°C 的低温环境,这样能更好地维持染色剂的稳定性,延长其有效使用期限 。在合适的储存条件下,染色剂的保质期通常为 [具体时长] 。但如果储存环境温度过高、湿度过大或频繁经历温度波动,可能会导致染色剂提前变质,影响染色效果,例如出现荧光强度减弱、背景信号增高等问题 。因此,务必严格按照推荐条件储存染色剂 。
3. 使用该染色剂进行核酸染色,样本有什么要求?
样本核酸应保持一定的纯度,避免含有过多的蛋白质、多糖、多酚等杂质 。这些杂质可能会干扰染色剂与核酸的结合,降低染色效果,甚至导致无法准确观察到核酸条带 。对于从细胞或组织中提取的核酸样本,在使用染色剂前,需通过合适的核酸纯化方法,如柱纯化、酚氯仿抽提等,去除杂质 。若样本核酸浓度过低,可能难以观察到清晰的条带,此时可通过浓缩样本,如使用乙醇沉淀等方法提高核酸浓度 。同时,核酸样本应避免反复冻融,以免造成核酸降解,影响染色结果的准确性 。若样本需长期保存,建议分成小份储存,使用时取出一份,减少样本受污染和降解的风险 。
4. 染色剂成分安全吗,操作时有哪些注意事项?
Getico Gelsafe DNA/RNA Gel Stain 是一种相对安全的核酸染色剂,与传统的溴化乙锭(EtBr)相比,其诱变性显著降低 。在 Ames 试验中,引起的突变数量远少于 EtBr 。并且在小鼠骨髓嗜染红细胞微核试验和小鼠精母细胞染色体畸变试验中,该染色剂均呈阴性结果 。但操作时仍需注意以下几点:
  • 防护措施:操作人员应佩戴防护手套、护目镜和实验服,防止染色剂与皮肤、眼睛直接接触 。若不慎接触到染色剂,应立即用大量清水冲洗受接触部位,若接触眼睛,冲洗后需及时就医 。
  • 操作环境:操作应在通风良好的环境中进行,尽管染色剂挥发性较低,但良好通风有助于减少潜在的吸入风险 。同时,要保持操作台面清洁,避免其他杂质污染染色剂和样本 。
  • 使用规范:严格按照产品说明书的步骤进行操作,包括染色剂的稀释比例、染色时间、温度等 。例如,该染色剂通常为高浓度溶液,使用时需按照规定比例稀释,如 20,000x 的浓缩液,可能需稀释至合适倍数用于预染色或后染色凝胶 。染色时间过短可能导致染色不充分,过长则可能出现背景染色过深的问题 。
  • 废弃物处理:使用完毕后,含有染色剂的废弃液体和凝胶等,应依据当地的生物安全和化学废弃物处理规定妥善处置,不可随意丢弃,以免对环境造成污染 。由于染色剂中可能含有少量的荧光物质,随意排放可能对生态环境产生潜在影响 。
  • 防污染措施:为防止交叉污染,不同样本在染色过程中应使用不同的移液器和耗材,避免样本间相互污染 。染色剂开启后,应尽快使用并妥善保存,防止长时间暴露在空气中被微生物污染 。
5. 染色剂检测核酸的原理是什么?
Getico Gelsafe DNA/RNA Gel Stain 通过与核酸分子特异性结合来实现染色 。该染色剂分子含有能与核酸的碱基对相互作用的结构域 。当染色剂与 DNA 或 RNA 结合后,其分子构象发生变化,从而在特定波长的光激发下能够发出荧光 。它具有多个荧光激发峰,当与核酸结合时,一个激发峰中心位于 309 nm,另一个位于 419 nm,还有一个可见激发峰在 514 nm 。其荧光发射峰中心位于 537 nm,呈现绿色荧光 。在凝胶电泳过程中,核酸在电场作用下迁移,不同大小和构象的核酸在凝胶中形成不同的条带 。染色剂与核酸结合后,使得核酸条带在紫外光或特定波长的可见光照射下发出荧光,从而能够被肉眼或成像设备观察到,帮助研究人员分析核酸的特性 。
6. 染色剂的灵敏度和特异性如何,能满足哪些实验需求?
  • 灵敏度:Getico Gelsafe DNA/RNA Gel Stain 具有较高的灵敏度,能够检测出低含量的核酸 。在琼脂糖凝胶电泳实验中,即使核酸样本量较少,也能通过其发出的荧光清晰地观察到条带 。与传统染色剂相比,在相同实验条件下,它能够更敏锐地检测到极微量的核酸,对于一些痕量核酸样本的分析具有明显优势,如在法医鉴定、古 DNA 研究等领域,少量的核酸样本经扩增后,可通过该染色剂准确检测 。
  • 特异性:对核酸具有良好的特异性,主要与 DNA 和 RNA 结合,与其他生物分子如蛋白质、多糖等几乎不发生非特异性结合 。这保证了在复杂的生物样本提取物中,能够准确地对核酸进行染色,避免因其他杂质的干扰而产生假阳性信号 。基于高灵敏度和特异性,该染色剂能够满足多种对核酸检测准确性要求高的实验需求,如基因克隆实验中对目的基因片段的检测、核酸纯度鉴定、基因表达分析中的 RNA 检测等 。在这些实验中,准确的核酸染色结果对于实验的成功与否至关重要 。
7. 染色过程中,有哪些关键步骤需要特别注意?
  • 样本准备:确保样本核酸的质量和浓度适宜 。如前文所述,要对核酸进行纯化和浓度调整,避免杂质和过低浓度对染色效果的影响 。同时,核酸样本应溶解在合适的缓冲液中,以维持其稳定性和结构完整性 。
  • 染色剂稀释:严格按照产品说明书要求的比例对染色剂进行稀释 。不同浓度的染色剂适用于不同的染色方法(预染色或后染色) 。例如,若用于预染色凝胶,可能需将 20,000x 的浓缩染色剂稀释至 [具体倍数];若用于后染色凝胶,稀释倍数可能有所不同 。稀释不准确可能导致染色过深或过浅,影响条带观察 。
  • 染色方法选择:预染色是在制备凝胶时将染色剂加入到融化的琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶溶液中,混合均匀后再进行凝胶灌制 。这种方法操作相对简便,但可能会因染色剂分布不均导致条带异常 。后染色则是在凝胶电泳结束后,将凝胶浸泡在含有染色剂的溶液中进行染色 。后染色能够更好地控制染色时间和程度,但操作步骤相对繁琐 。需根据实验需求和经验选择合适的染色方法 。
  • 染色时间和温度控制:染色时间应严格按照说明书推荐的时间进行 。染色时间过短,核酸与染色剂结合不充分,条带荧光较弱;染色时间过长,可能导致背景染色过深,影响条带分辨率 。染色温度一般在室温下进行,但在某些特殊情况下,可能需要在特定温度下孵育以促进染色反应 。例如,在低温环境下,染色反应可能较慢,适当提高温度(但不能超过核酸和染色剂的耐受温度)可加快染色进程,但需注意温度过高可能会导致核酸变性 。
  • 结果观察与记录:染色完成后,使用合适的成像设备观察和记录结果 。对于该染色剂,可使用标准的紫外透射仪或蓝色 LED 透射仪进行观察,核酸条带会呈现绿色荧光 。在成像时,要注意调整曝光时间、焦距等参数,以获取清晰、准确的图像 。同时,应及时对结果进行记录和分析,避免因时间过长导致荧光信号减弱 。
8. 按照操作步骤进行染色,却未观察到清晰的核酸条带,可能是什么原因?
  • 样本问题
  • 核酸降解:样本在提取、储存或操作过程中可能发生了降解,导致核酸片段过小或含量过低,难以被染色剂有效染色并观察到条带 。例如,样本反复冻融、受到核酸酶污染等都可能引起核酸降解 。可通过使用新鲜制备的样本、添加核酸酶抑制剂、优化储存条件等方法避免核酸降解 。
  • 核酸浓度过低:若样本中核酸含量太少,即使染色剂灵敏度较高,也可能无法产生足够强的荧光信号以观察到条带 。此时可通过浓缩样本、增加上样量或优化核酸提取方法来提高核酸浓度 。
  • 杂质干扰:样本中残留的蛋白质、多糖、酚类等杂质可能与染色剂结合或影响染色剂与核酸的结合,从而干扰染色效果 。在核酸提取过程中增加洗涤步骤、使用更有效的纯化方法去除杂质,有助于解决该问题 。
  • 染色剂问题
  • 染色剂失效:染色剂储存条件不当,如温度过高、光照等,可能导致染色剂中的有效成分分解或变性,使其失去染色能力 。若怀疑染色剂失效,可使用已知的阳性核酸样本对染色剂进行验证,若阳性样本也无法染色,则需更换新的染色剂 。
  • 稀释错误:未按照正确比例稀释染色剂,染色剂浓度过高可能导致背景染色过深掩盖条带,浓度过低则无法有效染色 。应重新准确稀释染色剂并进行染色实验 。
  • 操作问题
  • 染色时间和温度不当:染色时间过短,核酸与染色剂结合不充分;染色温度过高或过低,影响染色反应的进行 。需严格按照说明书要求的时间和温度进行染色 。
  • 电泳条件异常:电泳过程中电压过高、时间过长或过短等,可能导致核酸条带迁移异常或扩散,影响观察 。应优化电泳条件,确保核酸在凝胶中能够正常分离和迁移 。
  • 成像问题:成像设备参数设置不正确,如曝光时间过短、增益过低等,可能导致无法捕捉到清晰的荧光信号 。需重新调整成像设备参数,以获得最佳的成像效果 。
9. 染色剂可以单独购买其中的某些成分吗?
目前 Getico Gelsafe DNA/RNA Gel Stain 不支持单独购买其中的某些成分 。该染色剂是经过精心研发和配比的完整产品,其各成分之间相互协同作用,共同实现对核酸高效、准确的染色功能 。单独使用其中某一种成分无法达到预期的染色效果,且自行组合其他试剂难以保证染色剂的质量和性能,甚至可能因成分比例不当对核酸染色造成严重干扰,导致不准确的结果 。若染色剂不足或需要更多量进行实验,建议直接购买完整的染色剂产品 。
10. 该染色剂与其他品牌的核酸染色剂相比,优势是什么?
  • 高灵敏度与特异性:能够灵敏地检测到低含量的核酸,同时对核酸具有高度特异性,与其他生物分子几乎不发生非特异性结合 。相比部分其他品牌染色剂,在检测痕量核酸样本或复杂样本中的核酸时,能够更清晰、准确地显示核酸条带,减少假阳性和假阴性结果 。
  • 安全性高:与传统的溴化乙锭(EtBr)相比,诱变性显著降低,在相关毒性试验中表现良好 。对于操作人员和环境的潜在危害更小,符合现代实验室对安全实验试剂的要求 。在一些对实验安全性要求极高的场所,如高校教学实验室、生物安全实验室等,该染色剂的安全性优势尤为突出 。
  • 操作简便:染色操作流程相对简单,无论是预染色还是后染色方法,都有明确、易懂的操作指南 。与某些品牌染色剂复杂的操作步骤相比,能够节省实验人员的时间和精力,提高实验效率 。例如,在预染色过程中,只需将适量染色剂加入融化的凝胶溶液中搅拌均匀即可,无需额外复杂的处理步骤 。
  • 适用性广:适用于多种核酸样本类型和凝胶类型,无论是常见的琼脂糖凝胶电泳,还是聚丙烯酰胺凝胶电泳,对双链 DNA、单链 DNA 以及 RNA 都能进行有效染色 。相比之下,部分其他品牌染色剂可能仅对特定类型的核酸或凝胶具有较好的染色效果,适用范围较窄 。
  • 荧光特性良好:具有多个荧光激发峰和特定的荧光发射峰,在标准的紫外透射仪或蓝色 LED 透射仪下能发出明亮的绿色荧光,便于观察和成像 。其荧光强度和稳定性在一定时间内能够保持较好状态,有利于实验结果的准确记录和分析 。与一些荧光特性不稳定或需特殊成像设备的染色剂相比,具有明显优势 。



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