Gquant Protein BR Assay Kit

在蛋白质研究领域,准确测定蛋白质浓度是开展各类实验的基础。Gquant 蛋白质定量试剂盒正是为满足这一关键需求而精心设计的,它专为与任何 Qubit 荧光计搭配使用而研发。Qubit 荧光计以其高灵敏度和精准度在生物检测领域备受认可,Gquant 试剂盒与它的结合,为蛋白质浓度的测定提供了强大的技术支持。

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订购信息


产品名称产品编号规格价格(元)
Gquant Protein Assay Kit120201100 次(可进行 250 次检测反应)900.00
Gquant Protein Assay Kit120202500 次(可进行 1250 次检测反应)2500.00
Gquant Protein Assay Kit1202031000 次(可进行 2500 次检测反应)4000.00


产品描述

一、产品设计初衷与适配性


在蛋白质研究领域,准确测定蛋白质浓度是开展各类实验的基础。Gquant 蛋白质定量试剂盒正是为满足这一关键需求而精心设计的,它专为与任何 Qubit 荧光计搭配使用而研发。Qubit 荧光计以其高灵敏度和精准度在生物检测领域备受认可,Gquant 试剂盒与它的结合,为蛋白质浓度的测定提供了强大的技术支持。


二、检测范围与稳定性

(一)广泛的检测范围


当使用 1 到 20 μL 的样品进行检测时,Gquant 蛋白质定量试剂盒展现出了出色的检测能力,能够对浓度范围在 0.1 mg/mL 到 20 mg/mL 的样品进行准确量化。这一宽广的检测范围使得该试剂盒适用于多种不同浓度的蛋白质样品,无论是低浓度的珍贵蛋白质样本,还是高浓度的粗提蛋白质混合物,都能在该试剂盒的检测下获得可靠的结果。

(二)低蛋白质间差异


在实际的蛋白质检测中,不同蛋白质之间的结构和性质差异可能会对检测结果产生影响。然而,Gquant 蛋白质定量试剂盒在这方面表现卓越,它能够有效降低蛋白质间的差异对检测结果的干扰。这意味着,无论检测的是何种类型的蛋白质,都能保证检测结果的稳定性和准确性,为科研人员提供可信赖的数据。


三、选择性与抗干扰能力

(一)高度的蛋白质选择性


Gquant 蛋白质检测试剂盒对蛋白质具有高度的选择性。在复杂的生物样本中,除了蛋白质之外,还存在着各种其他生物分子,如核酸、糖类、脂质等。该试剂盒就像一个精准的 “蛋白质探测器”,能够特异性地识别并结合蛋白质,而对其他生物分子几乎不产生反应。这种高度的选择性使得科研人员能够在复杂的样本环境中准确地测定蛋白质的浓度,避免了其他生物分子的干扰,提高了检测结果的可靠性。

(二)对还原剂的耐受性


在蛋白质研究中,还原剂是常用的试剂之一,例如二硫苏糖醇(DTT)、β - 巯基乙醇等,它们可以破坏蛋白质分子中的二硫键,从而影响蛋白质的结构和功能。然而,Gquant 蛋白质检测试剂盒在存在还原剂的情况下依然能够保持准确的检测结果。这是因为该试剂盒的检测原理和试剂配方经过了精心设计,能够有效抵抗还原剂对检测过程的干扰,确保在含有还原剂的实验体系中也能准确测定蛋白质浓度。

(三)对常见污染物的耐受性


生物样本中常常存在各种污染物,如盐、游离核苷酸、氨基酸、溶剂和 DNA 等。这些污染物可能会对蛋白质检测结果产生影响,导致检测误差。但是,Gquant 蛋白质检测试剂盒对这些常见的污染物具有良好的耐受性。在检测过程中,这些污染物不会显著影响试剂盒与蛋白质的结合以及检测信号的产生,从而保证了检测结果的准确性。对于其他一些可能影响检测结果的污染物,科研人员只需对检测协议进行轻微修改,即可获得准确的检测结果。


四、检测方法的优势

(一)快速、简单且可靠


Gquant 蛋白质检测试剂盒提供了一种快速、简单且可靠的蛋白质浓度测定方法。整个检测过程操作简便,科研人员只需按照说明书的步骤,将样品与试剂盒中的试剂混合,然后使用 Qubit 4 荧光计进行读数,即可在短时间内获得蛋白质浓度的检测结果。这种快速简便的操作方式大大节省了科研人员的时间和精力,提高了实验效率。

(二)减少猜测工作和稀释步骤


传统的蛋白质定量方法往往需要科研人员根据经验对样品进行稀释,并且在检测过程中可能需要进行多次尝试才能确定合适的检测范围,这不仅增加了实验的复杂性,还容易引入误差。而 Gquant 蛋白质试剂盒可在较宽的范围(0.1 - 20 mg/mL)内提供准确的蛋白质定量,使得大多数样品可以以纯净(未稀释)的状态进行检测。这消除了伴随传统蛋白质定量方法的猜测工作和稀释步骤,减少了实验误差的来源,提高了检测结果的准确性和可重复性。

(三)适用样本类型广泛


该蛋白质试剂盒适用于多种类型的样品,包括纯化蛋白质、裂解物、血清、血浆或复杂蛋白质混合物等。无论是在基础研究中对单一蛋白质的纯化和定量,还是在临床诊断中对血清或血浆中蛋白质的检测,Gquant 蛋白质定量试剂盒都能发挥出色的作用,为不同领域的科研和应用提供了有力的支持。



使用说明书



1. Gquant Protein BR Assay Kit 适用于哪些样本类型?
该试剂盒适用范围广泛,可用于多种样本类型的蛋白质浓度测定。对于生物样本,如细胞裂解液、组织匀浆、血清、血浆等,都能实现准确检测。在细胞生物学研究中,使用该试剂盒对培养细胞的裂解液进行检测,能够有效测定细胞内蛋白质的含量,为研究细胞代谢、信号通路等提供关键数据支持。在临床诊断领域,针对血清和血浆样本,Gquant Protein BR Assay Kit 可辅助疾病的诊断与监测,例如通过检测特定蛋白质在血清中的浓度变化,帮助判断某些疾病的进展情况。此外,该试剂盒也适用于食品和农业领域相关样本的蛋白质检测。在食品检测中,可用于分析食品中的蛋白质含量,确保食品质量符合标准;在农业方面,可对农作物提取物或农产品加工制品进行蛋白质定量,为农业生产和产品研发提供依据。需要注意的是,虽然试剂盒适用样本类型众多,但对于一些特殊样本,如含有高浓度干扰物质(如某些特殊有机溶剂、未知成分的复杂混合物等)的样本,在检测前需进行适当的预处理或预实验,以评估试剂盒的适用性,确保检测结果的准确性。
2. 试剂盒的储存条件和保质期是怎样的?
试剂盒的储存条件对于保证其性能至关重要。试剂盒中的主要试剂,如检测用的工作液,通常需要储存于 2 - 8°C 的环境中,以维持试剂的稳定性,防止其成分发生降解或变质。若储存温度过高,例如超过 30°C,试剂中的某些活性成分可能会加速分解,导致检测灵敏度下降,使检测结果出现偏差。而对于试剂盒中的标准品,一般也在 2 - 8°C 条件下保存,以确保其浓度的准确性和稳定性,便于在检测过程中进行准确的定量校准。在规定的储存条件下,试剂盒的保质期通常为 12 个月。随着时间接近保质期,试剂盒的性能可能会逐渐降低。例如,临近保质期时,检测试剂与蛋白质结合的能力可能会减弱,导致检测信号变弱,影响检测的准确性。因此,在保质期临近时,建议先进行少量样本的检测,观察检测结果是否正常,确认试剂盒仍能满足实验需求后,再进行大规模使用。每次取用试剂盒中的试剂后,务必及时密封,并尽快放回规定的储存环境中,避免试剂受到外界环境因素(如温度波动、光照、湿度等)的影响而降低性能。
3. 使用 Gquant Protein BR Assay Kit 进行蛋白质定量,具体操作步骤是怎样的?
  • 准备工作:开启超净工作台,进行至少 30 分钟的紫外线消毒,确保操作环境的无菌性。准备好所需的实验耗材,如 96 孔板、无菌移液器、移液枪头、离心管等,并对其进行高压灭菌处理。从冰箱中取出试剂盒,在室温下平衡 30 分钟,使试剂温度与室温一致,避免因温度差异影响实验结果。同时,准备好待检测的蛋白质样本,若样本为细胞裂解液或组织匀浆等,需提前进行适当的预处理,如离心去除杂质等,以保证样本的纯净度,利于后续检测。
  • 标准曲线绘制:取出试剂盒中的标准品(一般为已知浓度的牛血清白蛋白,BSA),按照试剂盒说明书的要求,用稀释缓冲液将标准品进行梯度稀释,制备一系列不同浓度的标准品溶液,如 0 μg/ml、0.1 μg/ml、0.5 μg/ml、1 μg/ml、2 μg/ml、5 μg/ml、10 μg/ml、20 μg/ml 等。在 96 孔板中,每孔加入适量(如 20 μl)不同浓度的标准品溶液,每个浓度设置至少 3 个复孔,以保证数据的准确性。
  • 样本处理与加样:将待检测的蛋白质样本进行适当稀释(根据预估的蛋白质浓度确定稀释倍数,确保稀释后的样本浓度在试剂盒的检测范围内)。在 96 孔板的其他孔中,每孔加入 20 μl 稀释后的样本溶液,同样每个样本设置至少 3 个复孔。
  • 试剂添加与反应:向含有标准品和样本的 96 孔板各孔中,加入 200 μl 的检测工作液,轻轻振荡 96 孔板,使溶液充分混合。室温下孵育一定时间(通常为 5 - 10 分钟),在此期间,检测工作液中的染料会与蛋白质结合,形成稳定的复合物,复合物的颜色深浅与蛋白质浓度成正比。
  • 检测读数:孵育结束后,将 96 孔板放入酶标仪中,在特定波长(一般为 595 nm)下读取各孔的吸光度值(OD 值)。以标准品的浓度为横坐标,对应的 OD 值为纵坐标,绘制标准曲线。通过标准曲线,根据样本的 OD 值计算出样本中蛋白质的浓度。
4. 试剂盒中的试剂成分安全吗,操作时有哪些注意事项?
试剂盒中的试剂成分在正常使用情况下,对操作人员的健康风险较低,但仍需严格遵守安全操作规程。检测工作液中的染料可能对皮肤和眼睛有一定刺激性。在操作过程中,操作人员必须佩戴一次性手套,避免试剂直接接触皮肤。若不慎接触到皮肤,应立即用大量清水冲洗接触部位 15 分钟以上,若出现红肿、瘙痒等不适症状,需及时就医。同时,要佩戴护目镜,防止试剂溅入眼睛,一旦试剂入眼,应迅速用大量清水冲洗,并尽快前往医院进行专业处理,切勿揉搓眼睛,以免造成更严重的损伤。试剂盒中的标准品溶液,虽然一般无明显毒性,但也要避免误食。操作过程中严禁饮食、吸烟等行为,防止因误食试剂而对身体造成伤害。在使用移液器吸取试剂时,要确保移液器的准确性和密封性,避免试剂泄漏。对于使用过的实验耗材,如吸头、96 孔板等,应按照实验室废弃物处理规定进行妥善处置,不可随意丢弃。尤其是接触过样本的废弃物,可能携带生物危害,需进行高压灭菌等无害化处理后,再进行后续处理,以保障实验室环境安全。
5. Gquant Protein BR Assay Kit 检测蛋白质的原理是什么?
该试剂盒基于改进的考马斯亮蓝 G 方法进行蛋白质定量检测。考马斯亮蓝 G 在酸性条件下,其分子结构中的磺酸基(-SO₃⁻)会与蛋白质分子中的碱性氨基酸残基(如赖氨酸、精氨酸等)通过静电作用结合,同时染料分子与蛋白质分子之间还存在疏水相互作用,从而使染料紧密结合到蛋白质上。当考马斯亮蓝 G 与蛋白质结合后,其分子结构发生变化,导致吸收光谱发生显著改变。在未结合蛋白质时,考马斯亮蓝 G 主要以阳离子形式存在,呈现棕红色,最大吸收波长在 465 nm 左右;而与蛋白质结合后,形成的复合物为阴离子形式,呈现蓝色,最大吸收波长转移至 595 nm。并且,在一定的蛋白质浓度范围内,蛋白质浓度与 595 nm 处的吸光度值成正比关系。通过测量样本在 595 nm 波长下的吸光度,并与已知浓度的标准品溶液在相同条件下测得的吸光度进行比较,绘制标准曲线,进而根据标准曲线计算出样本中蛋白质的浓度。这种检测原理使得试剂盒具有较高的灵敏度和准确性,能够满足多种样本中蛋白质定量检测的需求。
6. 使用该试剂盒进行蛋白质定量,检测结果受哪些因素影响?
  • 样本因素:样本的纯度对检测结果影响较大。若样本中含有较多杂质,如核酸、多糖、脂类等,这些杂质可能会与检测试剂发生非特异性相互作用,干扰蛋白质与染料的结合,导致检测结果偏高。例如,当样本中核酸含量较高时,核酸可能会与考马斯亮蓝 G 结合,使吸光度增加,从而错误地提高了蛋白质浓度的测定值。样本的 pH 值也很关键,试剂盒的检测原理基于酸性环境下染料与蛋白质的结合,若样本的 pH 值偏离试剂盒适用的 pH 范围(一般为酸性环境),可能会影响染料与蛋白质的结合能力,导致检测结果不准确。样本中蛋白质的结构和性质也会产生影响,不同来源和类型的蛋白质,其氨基酸组成、空间结构等存在差异,与考马斯亮蓝 G 的结合能力也有所不同,可能导致检测结果存在偏差。
  • 操作因素:移液器的准确性至关重要。若移液器未校准或操作不当,导致吸取的标准品、样本或检测试剂体积不准确,会直接影响吸光度的测量,进而影响蛋白质浓度的计算结果。例如,移液器吸取的样本体积偏少,会使测得的吸光度偏低,计算出的蛋白质浓度也会偏低。在混合试剂和样本时,若混合不均匀,会导致局部反应不充分,使吸光度测量不准确。在孵育过程中,孵育时间和温度的控制也很关键。孵育时间过短,染料与蛋白质可能未充分结合,吸光度值偏低;孵育时间过长,可能会导致复合物的稳定性下降,也会影响吸光度的准确性。孵育温度若偏离规定温度,会影响反应速率和复合物的形成,同样对检测结果产生不利影响。
  • 仪器因素:酶标仪的性能和状态会影响检测结果。酶标仪的波长准确性、吸光度测量精度等指标若不准确,会导致测得的吸光度值出现偏差。例如,酶标仪的波长漂移,使得实际测量波长并非 595 nm,那么测得的吸光度值就不能真实反映蛋白质与染料复合物的情况,从而影响蛋白质浓度的计算。酶标仪的光源老化、检测器故障等问题,也可能导致吸光度测量不准确,进而影响检测结果的可靠性。
7. 按照操作步骤使用试剂盒,却发现检测结果不准确,可能是什么原因?
  • 样本相关原因
  • 样本污染:样本可能受到其他物质的污染。例如,在样本采集、处理过程中,若使用了不干净的器材,可能引入核酸、多糖等杂质。这些杂质会与检测试剂发生反应,干扰蛋白质定量结果。可通过对样本进行预处理,如使用核酸酶去除核酸污染,或者通过离心、过滤等方法去除其他杂质,然后重新进行检测。
  • 样本处理不当:样本的稀释倍数不准确可能导致检测结果异常。若稀释倍数过大,样本中蛋白质浓度过低,可能超出试剂盒的检测下限,使检测结果不准确;若稀释倍数过小,样本中蛋白质浓度过高,可能超出试剂盒的检测上限,同样影响结果准确性。应重新准确估算样本中蛋白质浓度,选择合适的稀释倍数,对样本进行稀释后再次检测。
  • 操作相关原因
  • 移液器误差:移液器长时间使用未校准,或者在吸取试剂和样本时操作不规范,如吸头未紧密安装、吸取液体时产生气泡等,都会导致移液体积不准确。可使用高精度电子天平对移液器进行校准,通过称量移取的纯水重量,根据水的密度计算实际移液体积,与设定体积进行比对,确保移液器的准确性。在操作移液器时,严格按照规范操作,选择合适的吸头,并确保吸头安装紧密,吸取液体时缓慢平稳,避免产生气泡。
  • 反应条件控制不当:孵育时间和温度未严格按照试剂盒说明书的要求进行控制。孵育时间过短,染料与蛋白质结合不充分;孵育时间过长,复合物可能会发生分解。孵育温度过高或过低,都会影响反应速率和复合物的稳定性。应重新设置孵育条件,按照说明书规定的时间和温度进行孵育,然后再次进行检测。在混合试剂和样本时,若混合不充分,会导致局部反应不一致,影响吸光度测量。需确保在加入检测试剂后,充分振荡 96 孔板,使试剂与样本均匀混合。
  • 仪器相关原因
  • 酶标仪故障:酶标仪的波长不准确、吸光度测量精度下降等问题,都可能导致检测结果不准确。例如,酶标仪的波长发生漂移,实际测量波长与设定的 595 nm 不一致,测得的吸光度就不能真实反映蛋白质与染料复合物的情况。应定期对酶标仪进行校准和维护,使用标准滤光片或标准溶液对酶标仪的波长准确性和吸光度测量精度进行检测和校准。若发现酶标仪存在故障,应及时联系专业维修人员进行维修。
  • 96 孔板质量问题:使用的 96 孔板可能存在质量问题,如各孔之间的透光性不一致,会导致在测量吸光度时出现误差。可更换质量可靠的 96 孔板,重新进行实验,观察检测结果是否改善。
8. Gquant Protein BR Assay Kit 可以和其他品牌的相关试剂搭配使用吗?
Gquant Protein BR Assay Kit 在一定程度上可以与其他品牌的部分相关试剂搭配使用,但在使用前需谨慎评估并进行预实验。在样本稀释方面,一些常见品牌的缓冲液,如 Tris - HCl 缓冲液、PBS 缓冲液等,若其 pH 值和离子强度与试剂盒要求相近,可用于稀释样本。例如,使用 Sigma 品牌的 PBS 缓冲液稀释蛋白质样本后,再用该试剂盒进行检测,在某些情况下能够得到较为准确的蛋白质定量结果。然而,不同品牌缓冲液的成分和浓度存在差异,可能会对检测结果产生影响。某些缓冲液中含有的特殊添加剂,可能会与试剂盒中的检测试剂发生相互作用,干扰蛋白质与染料的结合,导致检测结果不准确。在标准品方面,虽然试剂盒自带标准品,但在特殊情况下,若需要使用其他品牌的标准品,也应先进行验证。不同品牌标准品的纯度、稳定性以及与检测试剂的反应性可能有所不同,可能会影响标准曲线的准确性,进而影响样本蛋白质浓度的计算。例如,使用其他品牌的牛血清白蛋白作为标准品时,其与试剂盒中检测试剂的结合能力可能与试剂盒自带标准品存在差异,导致标准曲线的斜率发生变化。因此,在将 Gquant Protein BR Assay Kit 与其他品牌的相关试剂搭配使用前,务必进行充分的预实验,对比使用不同试剂组合时的检测结果,观察标准曲线的线性关系、检测结果的准确性和重复性等指标,根据实验结果确定是否能够兼容使用,避免因试剂不兼容而导致实验失败。


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