Gquant Protein HS Assay Kit

在当今的生命科学研究中,蛋白质定量分析是一项至关重要的技术,它广泛应用于蛋白质表达研究、酶活性测定、药物研发等众多领域。Gquant HS 蛋白定量试剂盒作为一款专门为蛋白质定量设计的产品,凭借其卓越的性能和便捷的操作,成为科研人员的得力助手。该试剂盒专为与任何 Qubit 荧光计配合使用而精心打造,旨在为科研人员提供准确、高效的蛋白质定量解决方案。

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订购信息


产品名称产品编号规格价格(元)
Gquant Protein HS Assay Kit120101100 次(可进行 250 次检测反应)800.00
Gquant Protein HS Assay Kit120102500 次(可进行 1250 次检测反应)2400.00
Gquant Protein HS Assay Kit1201031000 次(可进行 2500 次检测反应)3800.00


产品描述

一、产品概述


在当今的生命科学研究中,蛋白质定量分析是一项至关重要的技术,它广泛应用于蛋白质表达研究、酶活性测定、药物研发等众多领域。Gquant HS 蛋白定量试剂盒作为一款专门为蛋白质定量设计的产品,凭借其卓越的性能和便捷的操作,成为科研人员的得力助手。该试剂盒专为与任何 Qubit 荧光计配合使用而精心打造,旨在为科研人员提供准确、高效的蛋白质定量解决方案。


二、检测范围与稳定性


当使用 1 到 20 μL 体积的样品进行检测时,Gquant 蛋白质定量试剂盒展现出了令人瞩目的性能。它能够精确地对浓度范围在 12.5 μg/mL 到 5 mg/mL 的样品进行量化分析。更为重要的是,在多次重复检测过程中,样本间的差异极小。这一特性得益于其先进的检测技术和稳定的试剂配方,确保了实验结果的高度稳定性和可重复性。科研人员在使用该试剂盒时,可以放心地进行大量样本的检测,而无需担心因样本间差异导致的实验误差,从而为后续的数据分析和研究提供了可靠的基础。

三、选择性与抗干扰能力


(一)高度的蛋白质选择性


Gquant 蛋白质定量试剂盒对蛋白质具有高度的选择性。在复杂的生物样本中,存在着各种不同类型的生物分子,如核酸、糖类、脂质等。然而,该试剂盒就像一位精准的 “筛选器”,能够准确地识别并结合蛋白质分子,而对其他生物分子几乎不产生反应。这种高度的选择性使得科研人员能够在复杂的样本环境中准确地对蛋白质进行定量分析,避免了其他生物分子的干扰,提高了检测结果的准确性。

(二)对还原剂的耐受性


在许多蛋白质实验中,还原剂是常用的试剂之一,如二硫苏糖醇(DTT)等。这些还原剂可以打破蛋白质分子中的二硫键,从而影响蛋白质的结构和功能。然而,Gquant 蛋白质定量试剂盒在存在还原剂的情况下依然能够保持高度的准确性。这是因为该试剂盒的设计充分考虑了还原剂对检测结果的影响,并通过优化试剂配方和检测条件,有效地消除了还原剂的干扰。因此,科研人员在含有还原剂的实验体系中,无需担心还原剂对蛋白质定量结果的影响,可以放心地使用该试剂盒进行检测。

(三)对常见污染物的耐受性


除了还原剂,生物样本中还常常存在其他各种污染物,如乙醇、盐、游离核苷酸、氨基酸、溶剂和 DNA 等。Gquant 蛋白质定量试剂盒对这些常见的污染物具有良好的耐受性。在检测过程中,这些污染物不会对检测结果产生明显的影响。这表明该试剂盒具有较强的适应性,能够在复杂的样品环境中准确地对蛋白质进行定量。然而,需要注意的是,当样品中存在大量去污剂时,检测结果可能会受到一定影响。对于其他一些可能影响检测结果的污染物,科研人员只需对检测协议进行轻微修改,即可获得准确的检测结果。


四、使用便捷性


Gquant 蛋白质定量试剂盒为用户提供了浓缩的检测试剂、稀释缓冲液以及预稀释的标准品。这种精心的配置使得操作过程变得简单快捷。科研人员只需按照以下简单的步骤进行操作:首先,使用提供的缓冲液对浓缩的检测试剂进行稀释;然后,加入 1 μL 到 20 μL 之间任意体积的样品;最后,通过 Qubit 荧光计读取浓度值,即可轻松完成蛋白质的定量检测。这种简单的操作方式大大节省了科研人员的时间和精力,提高了实验效率。同时,预稀释的标准品也为检测结果的准确性提供了保障,科研人员无需自行准备标准品,减少了实验误差的来源。


使用说明书



1. Gquant Protein HS Assay Kit 适用于哪些样本类型?
Gquant Protein HS Assay Kit 在蛋白质浓度测定方面,展现出广泛的样本适用性。对于细胞相关样本,像细胞裂解液,无论是原核细胞还是真核细胞的裂解产物,该试剂盒都能精准测定其中的蛋白质含量,为细胞生理功能、基因表达调控等研究提供关键数据。组织匀浆同样适用,涵盖了动物的各种组织,如肝脏、肌肉、脑组织匀浆等,通过检测组织匀浆中的蛋白质浓度,有助于了解组织的代谢状态、疾病发生机制等。在体液样本中,血清和血浆(包括 EDTA 血浆、肝素血浆)都能被有效检测。在临床诊断中,通过检测血清或血浆中特定蛋白质的浓度,可辅助疾病的诊断、病情监测以及治疗效果评估,例如在肿瘤、心血管疾病等的研究中发挥重要作用。此外,细胞培养上清液也是适用的样本类型之一,在细胞培养实验中,通过测定培养上清液中的蛋白质浓度,能够了解细胞分泌蛋白的情况,对研究细胞间通讯、细胞因子分泌等具有重要意义。需要留意的是,对于富含高浓度核酸、多糖、脂类等杂质,或者含有特殊化学物质(如某些强还原剂、螯合剂)的样本,在检测前必须进行针对性的预处理,如核酸酶消化去除核酸、超速离心分离脂类等,或者先进行小范围预实验,以评估试剂盒对该样本的适用性,从而保障检测结果的精准可靠。
2. 试剂盒的储存条件和保质期分别是怎样的?
正确的储存条件对维持 Gquant Protein HS Assay Kit 的性能稳定起着决定性作用。试剂盒中的关键检测试剂,如检测工作液,通常需存放在 - 80°C 的超低温环境中。这是因为在这样的低温条件下,试剂中的活性成分能够最大程度保持稳定,避免发生降解或化学反应,防止其检测灵敏度和特异性受到损害。若储存温度过高,例如高于 - 20°C,试剂中的某些成分可能会逐渐分解,致使检测信号减弱,进而影响检测结果的准确性。对于试剂盒内的标准品,同样建议储存于 - 80°C 环境,以保证其浓度的长期稳定性,确保在实验过程中能够为蛋白质定量提供精准的校准依据。值得注意的是,试剂盒中的蛋白质检测染料对光极为敏感,因此应将其保存在避光的琥珀色管中,防止光照引发染料的光化学反应,降低其与蛋白质的结合能力。在遵循上述严格储存条件的情况下,试剂盒的保质期一般可达 12 个月。随着保质期临近,试剂盒的性能可能会出现一定程度的下滑。例如,临近保质期时,检测试剂与蛋白质的结合效率可能降低,导致标准曲线的线性度变差,样本蛋白质浓度的测量误差增大。所以,在保质期即将到期时,建议先进行少量标准样本和已知浓度样本的检测,仔细观察检测结果的准确性、重复性等指标,确认试剂盒仍能满足实验要求后,再大规模用于正式实验。每次取用试剂盒中的试剂后,务必迅速密封,并及时放回规定的储存环境,避免因温度波动、光照、湿度变化等外界因素干扰,致使试剂性能下降。
3. 使用 Gquant Protein HS Assay Kit 进行蛋白质定量,具体操作步骤是怎样的?
  • 准备工作:提前开启超净工作台,进行不少于 30 分钟的紫外线杀菌处理,营造无菌的操作环境。准备好所需的各类实验耗材,如无菌的 96 孔板、高精度移液器、配套移液枪头、离心管等,并对这些耗材进行高压蒸汽灭菌,确保无微生物污染。从 - 80°C 冰箱取出试剂盒后,将其置于室温环境下平衡 30 分钟,使试剂温度与室温一致,防止因温度差异导致实验过程中出现冷凝水等影响实验结果的因素。同时,对待检测的蛋白质样本进行预处理,若样本为细胞裂解液,需通过高速离心去除细胞碎片等杂质;若为组织匀浆,可能需要进一步过滤以提高样本的纯净度,为后续准确检测奠定基础。
  • 标准曲线绘制:取出试剂盒中的标准品(通常为高纯度的牛血清白蛋白,BSA),严格按照试剂盒说明书,用配套的稀释缓冲液对标准品进行梯度稀释。一般可制备一系列浓度梯度的标准品溶液,如 0 μg/ml、0.05 μg/ml、0.1 μg/ml、0.5 μg/ml、1 μg/ml、2 μg/ml、5 μg/ml 等。在 96 孔板中,每孔精确加入适量(如 10 μl)不同浓度的标准品溶液,为保证数据的可靠性和准确性,每个浓度至少设置 3 个复孔。
  • 样本处理与加样:根据预估的蛋白质样本浓度,对样本进行合理稀释。稀释倍数的选择要确保稀释后的样本浓度处于试剂盒的有效检测范围内。在 96 孔板的其他孔中,每孔加入 10 μl 稀释后的样本溶液,同样每个样本设置至少 3 个复孔,以便后续取平均值,减小实验误差。
  • 试剂添加与反应:向含有标准品和样本的 96 孔板各孔中,分别加入 200 μl 的检测工作液。加液后,使用微型振荡器或轻轻振荡 96 孔板,使溶液充分混合均匀,确保检测工作液中的染料与蛋白质充分接触并发生反应。将 96 孔板置于室温环境下孵育一定时间(一般为 5 - 15 分钟),在此期间,检测工作液中的特殊染料会与蛋白质特异性结合,形成稳定的复合物,复合物的颜色深浅与蛋白质浓度呈正相关。
  • 检测读数:孵育结束后,将 96 孔板小心放入酶标仪中,在特定波长(一般为 595 nm)下读取各孔的吸光度值(OD 值)。以标准品的浓度为横坐标,对应的 OD 值为纵坐标,运用数据分析软件或手工绘制标准曲线。通过标准曲线,根据样本的 OD 值,利用线性回归等方法计算出样本中蛋白质的准确浓度。
4. 试剂盒中的试剂成分安全吗,操作时有哪些注意事项?
在正常规范使用的前提下,Gquant Protein HS Assay Kit 中的试剂成分对操作人员的健康危害相对较低,但仍不可忽视安全操作的重要性。试剂盒中的检测工作液含有的染料,可能会对皮肤和眼睛产生一定程度的刺激。因此,操作人员在实验过程中必须全程佩戴一次性防护手套,防止试剂直接接触皮肤。一旦皮肤不慎接触到试剂,应立即用大量流动清水冲洗接触部位至少 15 分钟,若冲洗后皮肤出现红肿、瘙痒、刺痛等不适症状,需尽快就医诊治。同时,要佩戴护目镜,有效防止试剂溅入眼睛。若试剂不慎入眼,应迅速用大量清水冲洗眼睛,冲洗过程中需转动眼球,确保眼睛各部位都能被冲洗到,随后立即前往医院进行专业处理,切不可揉搓眼睛,以免加重眼部损伤。试剂盒中的标准品溶液,虽然一般毒性较低,但也应避免误食。在操作现场,严禁饮食、吸烟等行为,防止因误食试剂而对身体造成伤害。在使用移液器吸取试剂时,要确保移液器经过校准且性能良好,吸头安装紧密,避免试剂泄漏。对于使用过的实验耗材,如吸头、96 孔板等,必须严格按照实验室废弃物处理规范进行妥善处置。尤其是接触过生物样本的废弃物,可能携带生物危害因子,需先进行高压灭菌等无害化处理后,再按照相关规定进行后续处理,以保障实验室环境安全,防止交叉污染。
5. Gquant Protein HS Assay Kit 检测蛋白质的原理是什么?
Gquant Protein HS Assay Kit 基于先进的化学显色原理实现蛋白质的高灵敏度定量检测。其核心检测试剂中含有一种特殊的染料分子,在特定的酸性环境下,该染料分子中的某些官能团(如磺酸基等)能够与蛋白质分子中的碱性氨基酸残基(如赖氨酸、精氨酸等)通过静电引力紧密结合。同时,染料分子与蛋白质分子之间还存在疏水相互作用,进一步增强了二者的结合稳定性。当染料与蛋白质结合后,其分子结构发生显著改变,从而导致吸收光谱发生特征性变化。在未结合蛋白质时,染料主要以某种特定的离子形式存在,呈现特定颜色(如棕红色),此时其最大吸收波长在某一特定值(如 465 nm 左右)。而当染料与蛋白质成功结合形成复合物后,复合物呈现出不同的颜色(如蓝色),最大吸收波长也相应转移至 595 nm。并且,在试剂盒所设定的线性检测范围内,蛋白质浓度与在 595 nm 波长处测得的吸光度值呈现良好的线性正相关关系。通过精确测量样本在 595 nm 波长下的吸光度,并与已知浓度的标准品溶液在相同实验条件下测得的吸光度进行对比,绘制标准曲线,进而依据标准曲线准确计算出样本中蛋白质的浓度。这种检测原理赋予了试剂盒高灵敏度和准确性,能够满足从基础科研到临床诊断等多个领域对蛋白质定量检测的严苛需求。
6. 使用该试剂盒进行蛋白质定量,检测结果受哪些因素影响?
  • 样本因素:样本的纯度对检测结果的准确性影响显著。若样本中存在大量杂质,如核酸、多糖、脂类等,这些杂质可能会与检测试剂发生非特异性相互作用,干扰蛋白质与染料的特异性结合过程,最终导致检测结果偏高。例如,当样本中核酸含量较高时,核酸分子可能会与检测染料结合,使吸光度异常增加,从而错误地抬高蛋白质浓度的测定值。样本的 pH 值也是关键影响因素之一,由于试剂盒的检测原理依赖于特定的酸性环境,若样本的 pH 值偏离试剂盒适用的 pH 范围,可能会改变染料和蛋白质的带电状态,进而影响二者的结合能力,使检测结果出现偏差。此外,样本中蛋白质的结构和性质差异也不容忽视,不同来源和类型的蛋白质,其氨基酸组成、空间构象等各不相同,与检测染料的结合亲和力也有所差异,这可能导致在相同浓度下,不同蛋白质产生的检测信号强度不同,从而影响蛋白质浓度的准确测定。
  • 操作因素:移液器的精准度是影响实验结果的重要操作因素。若移液器长时间未校准,或者在吸取标准品、样本及检测试剂时操作不当,如吸头未正确安装、吸取液体时产生气泡等,都会导致移液体积不准确,直接影响吸光度的测量值,进而严重干扰蛋白质浓度的计算结果。例如,移液器吸取的样本体积偏少,会使测得的吸光度偏低,最终计算出的蛋白质浓度也会相应偏低。在混合试剂和样本时,若混合不均匀,会造成局部反应不充分,使得吸光度测量不能真实反映样本中蛋白质的实际浓度。在孵育过程中,孵育时间和温度的精确控制至关重要。孵育时间过短,染料与蛋白质可能未能充分结合,导致吸光度值偏低;孵育时间过长,复合物可能会发生分解或其他变化,同样影响吸光度的准确性。孵育温度若偏离规定温度,会改变反应速率和复合物的形成稳定性,对检测结果产生不利影响。
  • 仪器因素:酶标仪作为检测吸光度的关键仪器,其性能和状态直接关系到检测结果的可靠性。酶标仪的波长准确性、吸光度测量精度等指标若不准确,会导致测得的吸光度值出现偏差。例如,酶标仪的波长发生漂移,实际测量波长并非设定的 595 nm,那么测得的吸光度值就无法真实反映蛋白质与染料复合物的情况,从而严重影响蛋白质浓度的计算准确性。此外,酶标仪的光源老化、检测器故障等问题,也可能导致吸光度测量不准确,降低检测结果的可信度。同时,使用的 96 孔板的质量也不容忽视,若 96 孔板各孔之间的透光性存在差异,会在测量吸光度时引入误差,影响检测结果的一致性和准确性。
7. 按照操作步骤使用试剂盒,却发现检测结果不准确,可能是什么原因?
  • 样本相关原因
  • 样本污染:样本在采集、处理或储存过程中可能受到其他物质的污染。例如,在样本采集时,若使用了未经严格清洁和灭菌的器材,可能引入核酸、多糖等杂质。这些杂质会与检测试剂发生反应,干扰蛋白质定量的准确性。针对这种情况,可对样本进行进一步的纯化处理,如使用核酸酶降解核酸污染,或者通过离心、过滤等物理方法去除其他杂质,之后重新进行检测。
  • 样本处理不当:样本的稀释倍数不准确是导致检测结果异常的常见原因之一。若稀释倍数过大,样本中蛋白质浓度过低,可能低于试剂盒的检测下限,使检测结果不准确;若稀释倍数过小,样本中蛋白质浓度过高,超出试剂盒的检测上限,同样会影响结果的准确性。此时,应重新准确估算样本中蛋白质的浓度,选择合适的稀释倍数,对样本进行精确稀释后再次进行检测。
  • 操作相关原因
  • 移液器误差:移液器长时间频繁使用后,可能出现校准不准确的情况,或者在操作过程中存在不规范行为,如吸头未紧密安装、吸取液体时速度过快产生气泡等,这些都会导致移液体积出现偏差。为解决这一问题,可使用高精度电子天平对移液器进行校准,通过称量移取的纯水重量,根据水的密度精确计算实际移液体积,并与设定体积进行对比,确保移液器的准确性。在操作移液器时,务必严格按照规范流程进行,选择适配的吸头并确保安装牢固,吸取液体时动作要缓慢、平稳,避免产生气泡。
  • 反应条件控制不当:孵育时间和温度未严格遵循试剂盒说明书的要求进行控制。孵育时间过短,染料与蛋白质结合不充分,无法产生足够强的检测信号;孵育时间过长,复合物可能会发生分解或其他变化,影响检测结果的准确性。孵育温度过高或过低,都会显著影响反应速率和复合物的稳定性。因此,应重新设置孵育条件,严格按照说明书规定的时间和温度进行孵育,然后再次进行检测。在混合试剂和样本时,若混合不充分,会导致局部反应不一致,影响吸光度的准确测量。所以,在加入检测试剂后,必须充分振荡 96 孔板,确保试剂与样本均匀混合。
  • 仪器相关原因
  • 酶标仪故障:酶标仪的波长不准确、吸光度测量精度下降等问题,都可能导致检测结果不准确。例如,酶标仪的波长发生漂移,实际测量波长与设定的 595 nm 不一致,测得的吸光度就不能真实反映蛋白质与染料复合物的情况。为确保酶标仪的正常运行,应定期对其进行校准和维护,使用标准滤光片或标准溶液对酶标仪的波长准确性和吸光度测量精度进行检测和校准。若发现酶标仪存在故障,应及时联系专业维修人员进行维修。
  • 96 孔板质量问题:使用的 96 孔板可能存在质量缺陷,如各孔之间的透光性不一致,这会在测量吸光度时导致误差。可尝试更换质量可靠、经过严格质量检测的 96 孔板,重新进行实验,观察检测结果是否得到改善。
8. Gquant Protein HS Assay Kit 可以和其他品牌的相关试剂搭配使用吗?
在特定情况下,Gquant Protein HS Assay Kit 具备与部分其他品牌相关试剂搭配使用的可能性,但在实际搭配使用之前,必须进行谨慎评估并开展充分的预实验。在样本稀释环节,一些知名品牌的缓冲液,如常见的 Tris - HCl 缓冲液、PBS 缓冲液等,若其 pH 值和离子强度与试剂盒的要求相近,理论上可用于稀释样本。例如,使用 Sigma 品牌的 PBS 缓冲液稀释蛋白质样本后,再采用该试剂盒进行检测,在某些实验条件下能够获得较为准确的蛋白质定量结果。然而,不同品牌缓冲液的具体成分和浓度存在差异,可能会对检测结果产生潜在影响。某些缓冲液中含有的特殊添加剂,可能会与试剂盒中的检测试剂发生相互作用,干扰蛋白质与染料的结合过程,导致检测结果出现偏差。在标准品方面,尽管试剂盒本身配备了标准品,但在特殊实验需求下,若考虑使用其他品牌的标准品,同样需要预先进行验证。不同品牌标准品的纯度、稳定性以及与检测试剂的反应活性可能各不相同,这可能会对标准曲线的准确性产生影响,进而干扰样本蛋白质浓度的计算。例如,使用其他品牌的牛血清白蛋白作为标准品时,其与试剂盒中检测试剂的结合能力可能与试剂盒自带标准品存在差异,导致标准曲线的斜率发生变化。因此,在将 Gquant Protein HS Assay Kit 与其他品牌的相关试剂搭配使用之前,务必开展全面的预实验,对比不同试剂组合下的检测结果,重点观察标准曲线的线性关系、检测结果的准确性和重复性等关键指标,根据实验结果综合判断是否能够兼容使用,避免因试剂不兼容而导致实验失败,造成时间和资源的浪费。


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