Gquant dsDNA BR Assay Kit

在分子生物学的科研征程中,双链 DNA(dsDNA)的精准定量检测宛如一座灯塔,指引着无数科研人员深入探索基因奥秘的方向。Gquant dsDNA BR Assay Kit 作为一款专门为 dsDNA 定量检测打造的荧光试剂盒,以其快速、灵敏、精确的卓越性能,成为科研工作者手中的得力工具。这款试剂盒犹如一位技艺精湛的工匠,对 dsDNA 展现出了高度的选择性。它能够在复杂的生物样本环境中,精准地识别并结合 dsDNA,排除其他杂质的干扰。在 1 - 2000 ng 的浓度区间内,它呈现出极为出色的线性关系,就像一把精准的尺子,能够准确无误地测量出 dsDNA 的含量,为科研数据的准确性提供了坚实的保障。

900
数量:
库存:999999

订购信息


产品名称产品编号规格价格(元)
Gquant dsDNA BR Assay Kit126001100 次(可进行 250 次检测反应)900.00
Gquant dsDNA BR Assay Kit126002500 次(可进行 1250 次检测反应)2500.00
Gquant dsDNA BR Assay Kit1260031000 次(可进行 2500 次检测反应)4000.00


产品描述


在分子生物学的科研征程中,双链 DNA(dsDNA)的精准定量检测宛如一座灯塔,指引着无数科研人员深入探索基因奥秘的方向。Gquant dsDNA BR Assay Kit 作为一款专门为 dsDNA 定量检测打造的荧光试剂盒,以其快速、灵敏、精确的卓越性能,成为科研工作者手中的得力工具。


这款试剂盒犹如一位技艺精湛的工匠,对 dsDNA 展现出了高度的选择性。它能够在复杂的生物样本环境中,精准地识别并结合 dsDNA,排除其他杂质的干扰。在 1 - 2000 ng 的浓度区间内,它呈现出极为出色的线性关系,就像一把精准的尺子,能够准确无误地测量出 dsDNA 的含量,为科研数据的准确性提供了坚实的保障。


操作便捷性是该试剂盒的一大显著优势。科研人员只需将检测工作液与待测的 dsDNA 样品进行简单混合,随后便可借助 Qubit® 荧光仪或荧光酶标仪进行读数操作。整个过程简单易懂,无需繁琐的步骤和复杂的技巧,大大节省了实验时间和精力。而且,其检测结果稳定可靠,多次实验都能得到一致且准确的数据,让科研人员能够放心地将其应用于各类实验中。


在下一代测序(NGS)技术的大规模 DNA 样品定量领域,如 Input DNA 定量、DNA 文库定量等,Gquant dsDNA BR Assay Kit 堪称理想之选。在这些需要处理大量样品且对定量精度要求极高的应用场景中,它能够高效、准确地完成检测任务,为 NGS 实验的顺利开展提供了有力支持。


此外,该试剂盒还展现出了强大的抗干扰能力,对常规的污染物如蛋白质、盐类等具有较好的耐受性。即使样品中存在一定量的杂质,它依然能够准确地对 dsDNA 进行定量检测,确保实验结果不受外界因素的影响。


产品组分


编号组分名称浓度产品编号 / 规格



126001126002
1260AdsDNA BR Buffer1X50 mL250 mL
1260BdsDNA BR Standard 10 ng/μL in TE buffer1 mL1 mL
1260CdsDNA BR Standard 2100 ng/μL in TE buffer1 mL1 mL
1260DdsDNA BR Reagent200X0.25 mL1.25 mL

运输和保存


为确保产品在运输过程中的质量不受影响,本试剂盒采用冰袋运输的方式,为其营造一个稳定的低温环境。当您收到产品后,请将其妥善放置在 2 - 8℃ 的环境下,并注意避光保存。这样的保存条件能够保证试剂盒在 12 个月内始终保持良好的性能和稳定性,为您的实验提供可靠的保障。


注意事项

规避荧光淬灭


荧光染料普遍存在淬灭问题,这会严重影响检测结果的准确性。因此,在整个实验过程中,务必时刻注意避光操作。无论是在配制试剂、转移样品,还是保存试剂盒时,都要尽可能减少荧光染料与光线的接触时间,从而有效减缓荧光淬灭的速度,确保检测结果的可靠性。

规范处理标准品


对于 DNA 标准品,每次使用前需要进行规范的处理。先将其上下颠倒数次,使溶液充分混匀,然后进行瞬时离心数秒,让溶液集中在管底。需要特别注意的是,切勿对 DNA 标准品进行涡旋振荡,因为剧烈的振荡可能会破坏 DNA 分子的结构,进而影响检测结果的准确性。

做好安全防护


为了您的安全和健康着想,在操作本试剂盒时,请务必穿好实验服并佩戴一次性手套。实验服可以有效防止试剂溅到您的衣物和皮肤上,手套则可以避免您的手部直接接触到试剂,减少潜在的化学物质伤害。


实验步骤

使用 Qubit® 荧光仪进行 dsDNA 定量检测分析

实验准备


  • 在开启实验之前,应将试剂盒中的各个组分从储存环境中取出,放置在室温下使其恢复至室温。这是因为低温可能会影响试剂的活性和反应性能,恢复至室温可以确保实验过程中试剂能够正常发挥作用,从而提高检测结果的准确性。

  • 准备足量的 0.5 mL PCR 薄壁管,并对其进行清晰的标注。标注时,请避免在 PCR 管的侧壁进行,因为标注的痕迹可能会影响荧光信号的采集,导致检测结果出现偏差。为了获得更准确的检测效果,推荐您使用吉替科配套的 Qubit 定量管。

配制待检样品


  • 配制待检标准品:取 189 μL dsDNA buffer 分别加入到两个标准品 PCR 管中,接着向每个管中加入 1 μL dsDNA BR reagent,然后再分别加入 10 μL dsDNA Standard 1 和 dsDNA Standard 2 至相应的标准品 PCR 管中。加入后,轻轻涡旋振荡 2 - 3 秒,操作过程中要尽量避免产生气泡,因为气泡可能会干扰荧光信号的检测,导致结果不准确。

  • 配置检测工作液:根据待测样品的数量来配置工作液,每个样品按照 200 μL dsDNA buffer + 1 μL dsDNA BR reagent 的比例进行配置,并充分混匀。这样可以确保每个样品都能得到准确的检测。

  • 配制待检样品:取 180 - 199 μL 检测工作液加入到样本 PCR 管中,再分别加入 1 - 20 μL 待检样本,使 PCR 管中每个样本的终体积达到 200 μL。同样,加入后轻轻涡旋振荡 2 - 3 秒,尽量避免产生气泡。

检测


  • 将所有待检的 PCR 管放置在室温下,并注意避光孵育 2 分钟。这一步骤可以让试剂与样品充分反应,使荧光信号达到稳定状态,从而确保检测结果的准确性。

  • 按照 Qubit 荧光仪或者酶标仪的操作说明,选择 dsDNA BR 检测程序对样品进行荧光信号值的测定。在操作过程中,请严格按照仪器的使用说明进行操作,以获得准确可靠的检测结果。



1. Gquant dsDNA BR Assay Kit 适用于哪些样本类型?
Gquant dsDNA BR Assay Kit 在双链 DNA(dsDNA)定量检测方面展现出广泛的样本适用性。对于细胞样本而言,无论是原核细胞还是真核细胞,通过裂解细胞获取的细胞裂解液,经过适当处理去除 RNA、蛋白质等杂质后,均可作为该试剂盒的检测样本。例如在微生物学研究中,分析细菌细胞裂解液中的 dsDNA 含量,能够探究细菌的生长状态和遗传特性;在细胞生物学实验里,检测哺乳动物细胞裂解液中的 dsDNA,有助于研究细胞的增殖、分化等过程。
在组织样本方面,各类动物组织经匀浆处理得到的组织匀浆,同样适用于该试剂盒。在医学研究领域,检测肝脏、肾脏、肌肉等组织匀浆中的 dsDNA 含量,对研究组织的生理功能、疾病的发生机制以及药物对组织的影响具有重要意义。比如在肿瘤研究中,对比正常组织和肿瘤组织匀浆中的 dsDNA 含量差异,可为肿瘤的早期诊断和治疗方案的制定提供关键依据。
对于体液样本,血清、血浆(如 EDTA 血浆、肝素血浆)都可作为检测对象。在临床诊断中,检测血清或血浆中的 dsDNA,对于某些疾病的早期筛查、病情监测和预后评估至关重要。例如,在自身免疫性疾病中,患者血清中的 dsDNA 水平可能会发生显著变化,通过检测其含量,能够辅助医生判断疾病的活动程度和治疗效果。此外,脑脊液、羊水等特殊体液样本,在经过适当处理后,也可用于该试剂盒的检测,为相关疾病的诊断和研究提供有价值的信息。
然而,若样本中含有高浓度的多糖、脂类等杂质,或者存在某些特殊化学物质(如强氧化剂、重金属离子等),可能会干扰检测过程,导致结果不准确。对于此类样本,在使用试剂盒检测前,需要进行针对性的预处理。例如,采用有机溶剂萃取法去除脂类杂质,通过离子交换树脂去除重金属离子等,以提高样本的纯净度,保障检测结果的可靠性。
2. 试剂盒的储存条件和保质期分别是怎样的?
正确的储存条件是确保 Gquant dsDNA BR Assay Kit 性能稳定的关键因素。试剂盒中的核心试剂,如用于 dsDNA 定量的特异性荧光染料、相关酶类等,一般需要储存在 2 - 8°C 的低温环境中。在此温度区间内,试剂中的活性成分能够保持稳定,有效避免因温度过高导致的试剂降解或化学反应,从而维持试剂盒的检测灵敏度和特异性。若储存温度高于规定的 8°C,例如在 10°C 甚至更高温度下储存,试剂中的某些成分可能会逐渐分解,致使检测信号变弱,最终影响检测结果的准确性。对于试剂盒内的 dsDNA 标准品,同样建议储存在 2 - 8°C 环境中,以保证其浓度在较长时间内的稳定性,为 dsDNA 定量检测提供可靠的校准依据。
需要特别注意的是,试剂盒中的荧光染料对光较为敏感,光照可能引发染料的光化学反应,降低其与 dsDNA 的结合能力,进而影响检测效果。因此,荧光染料应保存在避光的琥珀色管中,最大程度减少光照对其造成的损害。在严格遵循上述储存条件的情况下,该试剂盒的保质期通常为 12 个月。随着保质期的临近,试剂盒的性能可能会出现一定程度的下降。例如,临近保质期时,检测试剂与 dsDNA 的结合效率可能降低,导致标准曲线的线性度变差,样本 dsDNA 含量的测量误差增大。所以,在保质期即将到期时,建议先进行少量标准样本和已知浓度样本的检测,仔细观察检测结果的准确性、重复性等指标,确认试剂盒仍能满足实验要求后,再大规模用于正式实验。每次取用试剂盒中的试剂后,务必迅速密封,并及时放回规定的储存环境,避免因温度波动、光照、湿度变化等外界因素干扰,致使试剂性能下降。
3. 使用 Gquant dsDNA BR Assay Kit 进行 dsDNA 定量,具体操作步骤是怎样的?
  • 准备工作:提前开启超净工作台,进行至少 30 分钟的紫外线杀菌处理,营造无菌的操作环境,以防止微生物污染对 dsDNA 检测结果产生干扰。准备好各类实验耗材,如无菌的 96 孔板、高精度移液器及其配套移液枪头、离心管等,并对这些耗材进行高压蒸汽灭菌处理,确保其无微生物污染。从 2 - 8°C 冰箱取出试剂盒后,将其置于室温环境下平衡 30 分钟,使试剂温度与室温一致,避免因温度差异导致实验过程中出现冷凝水等影响实验结果的因素。同时,对待检测的 dsDNA 样本进行预处理,若样本为细胞裂解液,需通过高速离心去除细胞碎片等杂质;若为组织匀浆,可能需要进一步过滤以提高样本的纯净度,为后续准确检测奠定基础。
  • 标准曲线绘制:取出试剂盒中的 dsDNA 标准品(通常为已知浓度的 dsDNA 模拟物),严格按照试剂盒说明书,用配套的稀释缓冲液对标准品进行梯度稀释。一般可制备一系列浓度梯度的标准品溶液,如 0 ng/μl、2 ng/μl、5 ng/μl、10 ng/μl、20 ng/μl、50 ng/μl、100 ng/μl、200 ng/μl、500 ng/μl、1000 ng/μl 等。在 96 孔板中,每孔精确加入适量(如 10 μl)不同浓度的标准品溶液,为保证数据的可靠性和准确性,每个浓度至少设置 3 个复孔。
  • 样本处理与加样:根据预估的 dsDNA 样本浓度,对样本进行合理稀释。稀释倍数的选择要确保稀释后的样本浓度处于试剂盒的有效检测范围内。在 96 孔板的其他孔中,每孔加入 10 μl 稀释后的样本溶液,同样每个样本设置至少 3 个复孔,以便后续取平均值,减小实验误差。
  • 试剂添加与反应:向含有标准品和样本的 96 孔板各孔中,分别加入 20 μl 的 dsDNA 定量反应液。加液后,使用微型振荡器或轻轻振荡 96 孔板,使溶液充分混合均匀,确保 dsDNA 定量反应液中的荧光染料与 dsDNA 充分接触并发生特异性结合。将 96 孔板置于荧光酶标仪中,按照试剂盒说明书规定的程序进行孵育反应,在此期间,荧光染料会与 dsDNA 结合,产生荧光信号,且荧光信号强度与 dsDNA 的初始含量呈正相关。
  • 检测读数:孵育反应结束后,将 96 孔板小心放入荧光酶标仪中,读取各孔的荧光信号强度值。以标准品的浓度为横坐标,对应的荧光信号强度值为纵坐标,运用数据分析软件或手工绘制标准曲线。通过标准曲线,根据样本的荧光信号强度值,利用线性回归等方法计算出样本中 dsDNA 的准确含量。
4. 试剂盒中的试剂成分安全吗,操作时有哪些注意事项?
在正常规范使用的前提下,Gquant dsDNA BR Assay Kit 中的试剂成分对操作人员的健康危害相对较低,但仍需严格遵守安全操作规范。试剂盒中的一些试剂,如用于 dsDNA 定量的荧光染料等,可能会对皮肤和眼睛产生一定程度的刺激。因此,操作人员在实验过程中必须全程佩戴一次性防护手套,防止试剂直接接触皮肤。一旦皮肤不慎接触到试剂,应立即用大量流动清水冲洗接触部位至少 15 分钟,若冲洗后皮肤出现红肿、瘙痒、刺痛等不适症状,需尽快就医诊治。同时,要佩戴护目镜,有效防止试剂溅入眼睛。若试剂不慎入眼,应迅速用大量清水冲洗眼睛,冲洗过程中需转动眼球,确保眼睛各部位都能被冲洗到,随后立即前往医院进行专业处理,切不可揉搓眼睛,以免加重眼部损伤。
试剂盒中的标准品溶液,虽然一般毒性较低,但也应避免误食。在操作现场,严禁饮食、吸烟等行为,防止因误食试剂而对身体造成伤害。在使用移液器吸取试剂时,要确保移液器经过校准且性能良好,吸头安装紧密,避免试剂泄漏。对于使用过的实验耗材,如吸头、96 孔板等,必须严格按照实验室废弃物处理规范进行妥善处置。尤其是接触过生物样本的废弃物,可能携带生物危害因子,需先进行高压灭菌等无害化处理后,再按照相关规定进行后续处理,以保障实验室环境安全,防止交叉污染。
5. Gquant dsDNA BR Assay Kit 检测 dsDNA 的原理是什么?
Gquant dsDNA BR Assay Kit 基于先进的荧光染料特异性结合原理实现 dsDNA 的高灵敏度定量检测。试剂盒中的荧光染料能够特异性地与 dsDNA 分子结合,且在结合后会发出荧光信号。其检测过程主要包括以下关键步骤:当将样本 dsDNA 与试剂盒中的荧光染料混合后,荧光染料会迅速与 dsDNA 分子发生特异性结合,形成 dsDNA - 荧光染料复合物。在一定的激发光照射下,该复合物会发出特定波长的荧光信号。并且,在试剂盒所设定的线性检测范围内,dsDNA 的初始含量与荧光信号强度呈现良好的线性正相关关系。通过精确测量样本在荧光酶标仪中的荧光信号强度,并与已知浓度的 dsDNA 标准品溶液在相同实验条件下测得的荧光信号强度进行对比,绘制标准曲线,进而依据标准曲线准确计算出样本中 dsDNA 的含量。这种检测原理赋予了试剂盒高灵敏度和准确性,能够满足从基础科研到临床诊断等多个领域对 dsDNA 定量检测的严苛需求。与传统的基于吸光度的核酸定量方法相比,基于荧光染料的 dsDNA 定量方法具有更高的选择性,能够有效排除样本中常见杂质(如蛋白质、游离核苷酸、盐类、去污剂等)的干扰,从而提供更为准确的 dsDNA 浓度测定结果。
6. 使用该试剂盒进行 dsDNA 定量,检测结果受哪些因素影响?
  • 样本因素:样本的纯度对检测结果的准确性影响显著。若样本中存在大量杂质,如基因组 RNA、蛋白质、多糖、脂类等,这些杂质可能会与检测试剂发生非特异性相互作用,干扰荧光染料与 dsDNA 的特异性结合,最终导致检测结果偏高或偏低。例如,当样本中基因组 RNA 含量较高时,RNA 可能会与荧光染料发生非特异性结合,使荧光信号异常增加,从而错误地抬高 dsDNA 含量的测定值。样本的完整性也是关键影响因素之一,由于 dsDNA 分子相对稳定,但在某些情况下(如受到核酸酶污染、物理损伤等)也可能发生降解,若样本在采集、处理或储存过程中出现 dsDNA 降解,会使检测结果偏低。此外,样本中 dsDNA 的结构和性质差异也不容忽视,不同来源的 dsDNA,其序列、二级结构等各不相同,与荧光染料的结合亲和力也有所差异,这可能导致在相同含量下,不同 dsDNA 产生的检测信号强度不同,从而影响 dsDNA 含量的准确测定。
  • 操作因素:移液器的精准度是影响实验结果的重要操作因素。若移液器长时间未校准,或者在吸取标准品、样本及检测试剂时操作不当,如吸头未正确安装、吸取液体时产生气泡等,都会导致移液体积不准确,直接影响 dsDNA 定量反应体系的组成,进而严重干扰 dsDNA 含量的计算结果。例如,移液器吸取的样本体积偏少,会使测得的荧光信号强度值偏小,最终计算出的 dsDNA 含量也会相应偏低。在混合试剂和样本时,若混合不均匀,会造成局部反应不充分,使得荧光信号强度测量不能真实反映样本中 dsDNA 的实际含量。在孵育反应过程中,反应温度、时间的偏差,会改变荧光染料与 dsDNA 的结合效率,对检测结果产生不利影响。例如,孵育反应温度过高或过低,会导致荧光染料与 dsDNA 的结合能力下降,使检测信号减弱。
  • 仪器因素:荧光酶标仪作为检测荧光信号强度的关键仪器,其性能和状态直接关系到检测结果的可靠性。荧光酶标仪的荧光检测灵敏度、波长准确性等指标若不准确,会导致测得的荧光信号强度值出现偏差。例如,荧光酶标仪的荧光检测灵敏度下降,可能无法准确检测到低含量 dsDNA 样本的荧光信号,使计算出的 dsDNA 含量偏低。此外,荧光酶标仪的光源老化、检测器故障等问题,也可能导致荧光信号测量不准确,降低检测结果的可信度。同时,使用的 96 孔板的质量也不容忽视,若 96 孔板各孔之间的透光性存在差异,会在测量荧光信号强度时引入误差,影响检测结果的一致性和准确性。
7. 按照操作步骤使用试剂盒,却发现检测结果不准确,可能是什么原因?
  • 样本相关原因
  • 样本污染:样本在采集、处理或储存过程中可能受到其他物质的污染。例如,在样本采集时,若使用了未经严格清洁和灭菌的器材,可能引入基因组 RNA、蛋白质等杂质。这些杂质会与检测试剂发生反应,干扰 dsDNA 定量的准确性。针对这种情况,可对样本进行进一步的纯化处理,如使用 RNase 降解基因组 RNA 污染,或者通过离心、过滤等物理方法去除其他杂质,之后重新进行检测。
  • 样本处理不当:样本的稀释倍数不准确是导致检测结果异常的常见原因之一。若稀释倍数过大,样本中 dsDNA 含量过低,可能低于试剂盒的检测下限,使检测结果不准确;若稀释倍数过小,样本中 dsDNA 含量过高,超出试剂盒的检测上限,同样会影响结果的准确性。此时,应重新准确估算样本中 dsDNA 的含量,选择合适的稀释倍数,对样本进行精确稀释后再次进行检测。
  • 操作相关原因
  • 移液器误差:移液器长时间频繁使用后,可能出现校准不准确的情况,或者在操作过程中存在不规范行为,如吸头未紧密安装、吸取液体时速度过快产生气泡等,这些都会导致移液体积出现偏差。为解决这一问题,可使用高精度电子天平对移液器进行校准,通过称量移取的纯水重量,根据水的密度精确计算实际移液体积,并与设定体积进行对比,确保移液器的准确性。在操作移液器时,务必严格按照规范流程进行,选择适配的吸头并确保安装牢固,吸取液体时动作要缓慢、平稳,避免产生气泡。
  • 反应条件控制不当:孵育反应的温度、时间未严格遵循试剂盒说明书的要求进行控制。反应温度过高或过低,时间过长或过短,都会影响荧光染料与 dsDNA 的结合效率,导致检测结果不准确。因此,应重新设置反应条件,严格按照说明书规定的温度和时间进行反应,然后再次进行检测。在混合试剂和样本时,若混合不充分,会导致局部反应不一致,影响荧光信号强度的准确测量。所以,在加入检测试剂后,必须充分振荡 96 孔板,确保试剂与样本均匀混合。
  • 仪器相关原因
  • 荧光酶标仪故障:荧光酶标仪的荧光检测灵敏度下降、波长不准确等问题,都可能导致检测结果不准确。例如,荧光酶标仪的荧光检测灵敏度下降,可能无法准确检测到低含量 dsDNA 样本的荧光信号,使计算出的 dsDNA 含量偏低。为确保荧光酶标仪的正常运行,应定期对其进行校准和维护,使用标准荧光物质或标准样本对荧光酶标仪的荧光检测灵敏度、波长准确性等指标进行检测和校准。若发现荧光酶标仪存在故障,应及时联系专业维修人员进行维修。
  • 96 孔板质量问题:使用的 96 孔板可能存在质量缺陷,如各孔之间的透光性不一致,这会在测量荧光信号强度时导致误差。可尝试更换质量可靠、经过严格质量检测的 96 孔板,重新进行实验,观察检测结果是否得到改善。
8. Gquant dsDNA BR Assay Kit 可以和其他品牌的相关试剂搭配使用吗?
在特定情况下,Gquant dsDNA BR Assay Kit 具备与部分其他品牌相关试剂搭配使用的可能性,但在实际搭配使用之前,必须进行谨慎评估并开展充分的预实验。在样本稀释环节,一些知名品牌的缓冲液,如常见的 Tris - HCl 缓冲液、PBS 缓冲液等,若其 pH 值和离子强度与试剂盒的要求相近,理论上可用于稀释样本。例如,使用 Thermo Fisher 品牌的 PBS 缓冲液稀释 dsDNA 样本后,再采用该试剂盒进行检测,在某些实验条件下能够获得较为准确的 dsDNA 定量结果。然而,不同品牌缓冲液的具体成分和浓度存在差异,可能会对检测结果产生潜在影响。某些缓冲液中含有的特殊添加剂,可能会与试剂盒中的检测试剂发生相互作用,干扰荧光染料与 dsDNA 的结合,导致检测结果出现偏差。
在标准品方面,尽管试剂盒本身配备了标准品,但在特殊实验需求下,若考虑使用其他品牌的标准品,同样需要预先进行验证。不同品牌标准品的纯度、稳定性以及与检测试剂的反应活性可能各不相同,这可能会对标准曲线的准确性产生影响,进而干扰样本 dsDNA 含量的计算。例如,使用其他品牌的 dsDNA 模拟物作为标准品时,其与试剂盒中荧光染料的结合能力可能与试剂盒自带标准品存在差异,导致标准曲线的斜率发生变化。因此,在将 Gquant dsDNA BR Assay Kit 与其他品牌的相关试剂搭配使用之前,务必开展全面的预实验,对比不同试剂组合下的检测结果,重点观察标准曲线的线性关系、检测结果的准确性和重复性等关键指标,根据实验结果综合判断是否能够兼容使用,避免因试剂不兼容而导致实验失败,造成时间和资源的浪费。


产品推荐

  • 账号登录
社交账号登录