Gquant 1X dsDNA BR Assay Kit

在当今蓬勃发展的分子生物学研究领域,对双链 DNA(dsDNA)进行精准、高效的定量检测,无疑是诸多科研实验的关键环节。Gquant 1X dsDNA BR Assay Kit 作为一款精心打造的荧光定量检测试剂盒,宛如一颗璀璨的明星,凭借其卓越的性能,为科研工作者带来了前所未有的便捷与精准。

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订购信息


产品名称产品编号规格价格(元)
Gquant 1X dsDNA BR Assay Kit125901100 次(可进行 250 次检测反应)900.00
Gquant 1X dsDNA BR Assay Kit125902500 次(可进行 1250 次检测反应)2500.00
Gquant 1X dsDNA BR Assay Kit1259031000 次(可进行 2500 次检测反应)4000.00


产品描述


在当今蓬勃发展的分子生物学研究领域,对双链 DNA(dsDNA)进行精准、高效的定量检测,无疑是诸多科研实验的关键环节。Gquant 1X dsDNA BR Assay Kit 作为一款精心打造的荧光定量检测试剂盒,宛如一颗璀璨的明星,凭借其卓越的性能,为科研工作者带来了前所未有的便捷与精准。


卓越性能,精准检测


这款试剂盒具备快速、灵敏、精确的显著特性。它犹如一位火眼金睛的 “猎手”,对 dsDNA 展现出了高度的选择性,能够在复杂的生物样本中迅速且精准地识别出 dsDNA。更为出色的是,在 1 - 2000 ng 的浓度区间内,它呈现出近乎完美的线性关系。这意味着科研人员在这个广泛的浓度范围内进行检测时,能够得到高度准确、可靠的结果,为科研数据的质量提供了坚实的保障。


操作简便,轻松上手


操作的简便性是 Gquant 1X dsDNA BR Assay Kit 的一大亮点。科研人员只需将检测工作液与待测的 dsDNA 样品进行简单混合,随后便可以使用 Qubit® 荧光仪或荧光酶标仪进行读数操作。整个过程无需复杂的步骤和高深的技巧,即使是实验新手也能轻松驾驭。而且,该试剂盒的检测结果稳定可靠,多次实验均能得到一致且准确的数据,让科研人员无需为结果的不确定性而担忧。


理想之选,助力科研


对于下一代测序(NGS)过程中的大规模 DNA 样品定量工作,如 Input DNA 定量、DNA 文库定量等,Gquant 1X dsDNA BR Assay Kit 无疑是理想之选。在这些大规模的实验场景中,需要处理大量的 DNA 样品,并且对定量的准确性和效率要求极高。该试剂盒不仅能够满足大规模检测的需求,还能确保每一个样品的定量结果都精确无误,为 NGS 实验的顺利进行提供了有力支持。


耐受污染,稳定可靠


在实际的生物样本中,常常会存在蛋白质、盐类等杂质,这些污染物可能会干扰一些检测方法的准确性。然而,Gquant 1X dsDNA BR Assay Kit 凭借其独特的设计和优化的配方,展现出了对常规污染物的良好耐受性。即使样品中存在一定量的杂质,它依然能够准确地对 dsDNA 进行定量检测,为科研实验提供了稳定可靠的结果。


产品组分


编号组分名称浓度产品编号 / 规格



125901125902
1259AdsDNA BR working solution1X50 mL250 mL
1259BdsDNA BR Standard 10 ng/μL in TE buffer1 mL1 mL
1259CdsDNA BR Standard 2100 ng/μL in TE buffer1 mL1 mL


运输和保存

为了确保产品在运输过程中的质量不受影响,本试剂盒采用冰袋运输的方式,为其提供一个稳定的低温环境。当您收到产品后,请将其放置在 2 - 8℃ 的环境下,并注意避光保存。这样的保存条件能够保证试剂盒在 12 个月内始终保持良好的性能和稳定性。


注意事项

避免荧光淬灭


荧光染料普遍存在淬灭现象,这会严重影响检测结果的准确性。因此,在整个实验过程中,请务必尽量注意避光操作。无论是在配制试剂、转移样品,还是保存试剂盒时,都要减少荧光染料与光线的接触时间,从而减缓荧光淬灭的速度,确保检测结果的可靠性。

标准品处理


对于 DNA 标准品,每次使用前需要进行适当的处理。先将其上下颠倒数次,使溶液充分混匀,然后进行瞬时离心数秒,让溶液集中在管底。需要特别注意的是,请勿对 DNA 标准品进行涡旋振荡,因为剧烈的振荡可能会破坏 DNA 分子的结构,进而影响检测结果的准确性。

安全防护


为了保障您的安全和健康,在操作本试剂盒时,请务必穿好实验服并佩戴一次性手套。实验服可以防止试剂溅到您的衣物和皮肤上,手套则可以避免您的手部直接接触到试剂,减少潜在的化学物质伤害。


实验步骤


使用 Qubit® 荧光仪进行 dsDNA 定量检测分析

实验准备


  • 在开始实验之前,应将试剂盒中的各个组分从储存环境中取出,放置在室温下使其恢复至室温。这是因为低温可能会影响试剂的活性和反应性能,恢复至室温可以确保实验过程中试剂能够正常发挥作用,从而提高检测结果的准确性。

  • 准备足够数量的 0.5 mL PCR 薄壁管,并对其进行清晰的标注。标注时,请避免在 PCR 管的侧壁进行,因为标注的痕迹可能会影响荧光信号的采集,导致检测结果出现偏差。为了获得更准确的检测效果,推荐您使用本公司专门的 Qubit assay tubes。

配制待检样品


  • 配制待检标准品:取 190 μL 工作液加入到标准品 PCR 管中,然后分别将 10 μL dsDNA Standard 1 和 dsDNA Standard 2 加入到相应的标准品 PCR 管中。加入后,轻轻涡旋振荡 2 - 3 秒,在操作过程中要尽量避免产生气泡,因为气泡可能会干扰荧光信号的检测,导致结果不准确。

  • 配制待检样品:取 180 - 199 μL 检测工作液加入到样本 PCR 管中,再分别加入 1 - 20 μL 待检样本,使 PCR 管中每个样本的终体积达到 200 μL。同样,加入后轻轻涡旋振荡 2 - 3 秒,尽量避免产生气泡。

检测


  • 将所有待检的 PCR 管放置在室温下,并注意避光孵育 2 分钟。这一步骤可以让试剂与样品充分反应,使荧光信号达到稳定状态,从而确保检测结果的准确性。

  • 按照 Qubit® 荧光仪或者酶标仪的操作说明,选择 1X dsDNA High Sensitivity 检测程序对样品进行荧光信号值的测定。在操作过程中,请严格按照仪器的使用说明进行操作,以获得准确可靠的检测结果。


1. Gquant 1X dsDNA BR Assay Kit 适用于哪些样本类型?
Gquant 1X dsDNA BR Assay Kit 在双链 DNA(dsDNA)定量检测方面,展现出广泛的样本适用性。细胞样本无论是原核细胞还是真核细胞,其裂解液在适当处理,去除 RNA、蛋白质等杂质后,都可作为检测样本。例如,在微生物学研究中,分析细菌细胞裂解液中的 dsDNA 含量,能探究细菌生长状态与遗传特性;细胞生物学实验里,检测哺乳动物细胞裂解液中的 dsDNA,对研究细胞增殖、分化过程至关重要。
各类动物组织经匀浆处理后的组织匀浆,同样适用于该试剂盒。在医学研究领域,检测肝脏、肾脏、肌肉等组织匀浆中的 dsDNA 含量,对研究组织生理功能、疾病发生机制及药物对组织的影响意义重大。比如肿瘤研究中,对比正常组织与肿瘤组织匀浆的 dsDNA 含量差异,能为肿瘤早期诊断和治疗方案制定提供关键依据。
体液样本中的血清、血浆(如 EDTA 血浆、肝素血浆)均可用于检测。临床诊断中,检测血清或血浆中的 dsDNA,对某些疾病的早期筛查、病情监测和预后评估至关重要。像自身免疫性疾病,患者血清中 dsDNA 水平会显著变化,检测其含量可辅助医生判断疾病活动程度与治疗效果。此外,脑脊液、羊水等特殊体液样本,经适当处理后也能用于检测,为相关疾病诊断和研究提供有价值信息。
然而,若样本含高浓度多糖、脂类等杂质,或存在强氧化剂、重金属离子等特殊化学物质,可能干扰检测,导致结果不准确。此类样本使用试剂盒检测前,需进行针对性预处理,如用有机溶剂萃取法去除脂类杂质,通过离子交换树脂去除重金属离子等,以提高样本纯净度,保障检测结果可靠性。
2. 试剂盒的储存条件和保质期分别是怎样的?
正确储存是确保 Gquant 1X dsDNA BR Assay Kit 性能稳定的关键。试剂盒中的核心试剂,如 dsDNA 定量的特异性荧光染料、相关酶类等,通常需储存在 2 - 8°C 低温环境。在此温度区间,试剂活性成分稳定,可有效避免因温度过高导致的试剂降解或化学反应,维持试剂盒检测灵敏度与特异性。若储存温度高于 8°C,如 10°C 甚至更高,试剂中某些成分可能逐渐分解,使检测信号变弱,影响结果准确性。试剂盒内的 dsDNA 标准品,也建议存于 2 - 8°C 环境,保证其浓度长期稳定,为 dsDNA 定量检测提供可靠校准依据。
需注意,试剂盒中的荧光染料对光敏感,光照易引发光化学反应,降低其与 dsDNA 的结合能力,影响检测效果。因此,荧光染料应保存在避光的琥珀色管中,减少光照损害。严格遵循上述储存条件,试剂盒保质期通常为 12 个月。临近保质期时,试剂盒性能可能下降,如检测试剂与 dsDNA 结合效率降低,标准曲线线性度变差,样本 dsDNA 含量测量误差增大。所以,保质期临近时,建议先对少量标准样本和已知浓度样本进行检测,观察结果准确性、重复性等指标,确认试剂盒仍能满足实验要求后,再大规模用于正式实验。每次取用试剂后,务必迅速密封并放回规定储存环境,避免温度波动、光照、湿度变化等外界因素干扰,致使试剂性能下降。
3. 使用 Gquant 1X dsDNA BR Assay Kit 进行 dsDNA 定量,具体操作步骤是怎样的?
  • 准备工作:提前开启超净工作台,进行至少 30 分钟紫外线杀菌,营造无菌操作环境,防止微生物污染干扰 dsDNA 检测结果。准备好无菌 96 孔板、高精度移液器及配套移液枪头、离心管等实验耗材,并高压蒸汽灭菌,确保无微生物污染。从 2 - 8°C 冰箱取出试剂盒后,室温平衡 30 分钟,使试剂温度与室温一致,避免温度差异导致实验中出现冷凝水等影响结果的因素。同时,对待测 dsDNA 样本预处理,若样本为细胞裂解液,需高速离心去除细胞碎片等杂质;若为组织匀浆,可能需进一步过滤提高样本纯净度,为准确检测奠定基础。
  • 标准曲线绘制:取出试剂盒中的 dsDNA 标准品(一般为已知浓度的 dsDNA 模拟物),按试剂盒说明书,用配套稀释缓冲液对标准品进行梯度稀释。通常可制备一系列浓度梯度的标准品溶液,如 0 ng/μl、2 ng/μl、5 ng/μl、10 ng/μl、20 ng/μl、50 ng/μl、100 ng/μl、200 ng/μl、500 ng/μl、1000 ng/μl 等。在 96 孔板中,每孔精确加入适量(如 10 μl)不同浓度的标准品溶液,为保证数据可靠准确,每个浓度至少设 3 个复孔。
  • 样本处理与加样:根据预估的 dsDNA 样本浓度,合理稀释样本。稀释倍数选择要确保稀释后样本浓度在试剂盒有效检测范围内。在 96 孔板其他孔中,每孔加入 10 μl 稀释后的样本溶液,每个样本同样至少设 3 个复孔,以便后续取平均值,减小实验误差。
  • 试剂添加与反应:向含标准品和样本的 96 孔板各孔中,分别加入 20 μl 的 dsDNA 定量反应液。加液后,用微型振荡器或轻轻振荡 96 孔板,使溶液充分混合均匀,确保 dsDNA 定量反应液中的荧光染料与 dsDNA 充分接触并特异性结合。将 96 孔板置于荧光酶标仪中,按试剂盒说明书规定程序进行孵育反应,期间荧光染料与 dsDNA 结合产生荧光信号,且荧光信号强度与 dsDNA 初始含量呈正相关。
  • 检测读数:孵育反应结束,将 96 孔板小心放入荧光酶标仪,读取各孔荧光信号强度值。以标准品浓度为横坐标,对应荧光信号强度值为纵坐标,用数据分析软件或手工绘制标准曲线。通过标准曲线,依据样本荧光信号强度值,利用线性回归等方法计算出样本中 dsDNA 的准确含量。
4. 试剂盒中的试剂成分安全吗,操作时有哪些注意事项?
正常规范使用下,Gquant 1X dsDNA BR Assay Kit 试剂成分对操作人员健康危害相对较低,但仍需严格遵守安全操作规范。试剂盒中的荧光染料等试剂,可能对皮肤和眼睛有一定刺激。操作人员实验全程必须佩戴一次性防护手套,防止试剂接触皮肤。一旦皮肤接触试剂,立即用大量流动清水冲洗接触部位至少 15 分钟,若冲洗后皮肤出现红肿、瘙痒、刺痛等不适,需尽快就医。同时要佩戴护目镜,防止试剂溅入眼睛。若试剂入眼,迅速用大量清水冲洗眼睛,冲洗时转动眼球,确保眼睛各部位被冲洗到,随后立即就医,切勿揉搓眼睛,以免加重眼部损伤。
试剂盒中的标准品溶液一般毒性较低,但应避免误食。操作现场严禁饮食、吸烟等行为,防止误食试剂伤害身体。使用移液器吸取试剂时,要确保移液器校准且性能良好,吸头安装紧密,避免试剂泄漏。用过的实验耗材,如吸头、96 孔板等,严格按实验室废弃物处理规范妥善处置。尤其是接触过生物样本的废弃物,可能携带生物危害因子,需先高压灭菌等无害化处理,再按规定后续处理,保障实验室环境安全,防止交叉污染。
5. Gquant 1X dsDNA BR Assay Kit 检测 dsDNA 的原理是什么?
Gquant 1X dsDNA BR Assay Kit 基于荧光染料特异性结合原理,实现 dsDNA 高灵敏度定量检测。试剂盒中的荧光染料能特异性与 dsDNA 分子结合,结合后发出荧光信号。检测时,样本 dsDNA 与荧光染料混合,染料迅速与 dsDNA 分子特异性结合,形成 dsDNA - 荧光染料复合物。在特定激发光照射下,该复合物发出特定波长荧光信号。在试剂盒设定的线性检测范围内,dsDNA 初始含量与荧光信号强度呈良好线性正相关。通过精确测量样本在荧光酶标仪中的荧光信号强度,并与已知浓度的 dsDNA 标准品溶液在相同实验条件下测得的荧光信号强度对比,绘制标准曲线,进而依据标准曲线准确计算出样本中 dsDNA 含量。这种检测原理赋予试剂盒高灵敏度和准确性,能满足基础科研到临床诊断等多领域对 dsDNA 定量检测的严苛需求。与传统基于吸光度的核酸定量方法相比,基于荧光染料的 dsDNA 定量方法选择性更高,可有效排除样本中常见杂质(如蛋白质、游离核苷酸、盐类、去污剂等)干扰,提供更准确的 dsDNA 浓度测定结果。
6. 使用该试剂盒进行 dsDNA 定量,检测结果受哪些因素影响?
  • 样本因素:样本纯度对检测结果准确性影响显著。若样本含大量杂质,如基因组 RNA、蛋白质、多糖、脂类等,这些杂质可能与检测试剂发生非特异性相互作用,干扰荧光染料与 dsDNA 特异性结合,导致检测结果偏高或偏低。比如样本中基因组 RNA 含量高时,RNA 可能与荧光染料非特异性结合,使荧光信号异常增加,错误抬高 dsDNA 含量测定值。样本完整性也很关键,dsDNA 分子虽相对稳定,但在核酸酶污染、物理损伤等情况下可能降解,若样本采集、处理或储存中 dsDNA 降解,会使检测结果偏低。此外,样本中 dsDNA 结构和性质差异也不容忽视,不同来源 dsDNA,序列、二级结构等不同,与荧光染料结合亲和力有差异,可能导致相同含量下,不同 dsDNA 产生检测信号强度不同,影响 dsDNA 含量准确测定。
  • 操作因素:移液器精准度是影响实验结果的重要操作因素。移液器若长时间未校准,或吸取标准品、样本及检测试剂时操作不当,如吸头未正确安装、吸取液体产生气泡等,都会导致移液体积不准确,直接影响 dsDNA 定量反应体系组成,严重干扰 dsDNA 含量计算结果。例如,移液器吸取样本体积偏少,测得荧光信号强度值偏小,最终计算出的 dsDNA 含量也会相应偏低。混合试剂和样本时,若混合不均匀,会造成局部反应不充分,使荧光信号强度测量不能真实反映样本中 dsDNA 实际含量。孵育反应过程中,反应温度、时间偏差,会改变荧光染料与 dsDNA 结合效率,对检测结果产生不利影响。如孵育反应温度过高或过低,会使荧光染料与 dsDNA 结合能力下降,检测信号减弱。
  • 仪器因素:荧光酶标仪作为检测荧光信号强度的关键仪器,其性能和状态直接关系检测结果可靠性。荧光酶标仪荧光检测灵敏度、波长准确性等指标不准确,会导致测得的荧光信号强度值偏差。例如,荧光酶标仪荧光检测灵敏度下降,可能无法准确检测低含量 dsDNA 样本荧光信号,使计算出的 dsDNA 含量偏低。此外,荧光酶标仪光源老化、检测器故障等问题,也可能导致荧光信号测量不准确,降低检测结果可信度。同时,使用的 96 孔板质量也很重要,若 96 孔板各孔透光性有差异,测量荧光信号强度时会引入误差,影响检测结果一致性和准确性。
7. 按照操作步骤使用试剂盒,却发现检测结果不准确,可能是什么原因?
  • 样本相关原因
  • 样本污染:样本采集、处理或储存时可能受其他物质污染。如采集样本时,使用未经严格清洁和灭菌的器材,可能引入基因组 RNA、蛋白质等杂质。这些杂质会与检测试剂反应,干扰 dsDNA 定量准确性。针对此情况,可对样本进一步纯化,如用 RNase 降解基因组 RNA 污染,或通过离心、过滤等物理方法去除其他杂质,之后重新检测。
  • 样本处理不当:样本稀释倍数不准确是导致检测结果异常常见原因。稀释倍数过大,样本中 dsDNA 含量过低,可能低于试剂盒检测下限,使检测结果不准确;稀释倍数过小,样本中 dsDNA 含量过高,超出试剂盒检测上限,同样影响结果准确性。此时,应重新准确估算样本中 dsDNA 含量,选择合适稀释倍数,精确稀释样本后再次检测。
  • 操作相关原因
  • 移液器误差:移液器长时间频繁使用,可能校准不准确,或操作存在不规范行为,如吸头未紧密安装、吸取液体速度过快产生气泡等,都会导致移液体积偏差。解决办法是用高精度电子天平校准移液器,通过称量移取的纯水重量,根据水密度精确计算实际移液体积,并与设定体积对比,确保移液器准确性。操作移液器时,务必严格按规范流程,选择适配吸头并确保安装牢固,吸取液体动作要缓慢、平稳,避免产生气泡。
  • 反应条件控制不当:孵育反应温度、时间未严格按试剂盒说明书要求控制。反应温度过高或过低,时间过长或过短,都会影响荧光染料与 dsDNA 结合效率,导致检测结果不准确。因此,应重新设置反应条件,严格按说明书规定温度和时间反应,然后再次检测。混合试剂和样本时,若混合不充分,会导致局部反应不一致,影响荧光信号强度准确测量。所以,加入检测试剂后,必须充分振荡 96 孔板,确保试剂与样本均匀混合。
  • 仪器相关原因
  • 荧光酶标仪故障:荧光酶标仪荧光检测灵敏度下降、波长不准确等问题,都可能导致检测结果不准确。例如,荧光酶标仪荧光检测灵敏度下降,可能无法准确检测低含量 dsDNA 样本荧光信号,使计算出的 dsDNA 含量偏低。为确保荧光酶标仪正常运行,应定期校准和维护,用标准荧光物质或标准样本检测和校准荧光酶标仪的荧光检测灵敏度、波长准确性等指标。若发现荧光酶标仪故障,应及时联系专业维修人员维修。
  • 96 孔板质量问题:使用的 96 孔板可能存在质量缺陷,如各孔透光性不一致,测量荧光信号强度时会导致误差。可尝试更换质量可靠、经严格质量检测的 96 孔板,重新实验,观察检测结果是否改善。
8. Gquant 1X dsDNA BR Assay Kit 可以和其他品牌的相关试剂搭配使用吗?
特定情况下,Gquant 1X dsDNA BR Assay Kit 有与部分其他品牌相关试剂搭配使用的可能,但实际搭配前,必须谨慎评估并进行充分预实验。样本稀释时,一些知名品牌缓冲液,如常见的 Tris - HCl 缓冲液、PBS 缓冲液等,若 pH 值和离子强度与试剂盒要求相近,理论上可用于稀释样本。例如,用 Thermo Fisher 品牌的 PBS 缓冲液稀释 dsDNA 样本后,用该试剂盒检测,在某些实验条件下能获较准确的 dsDNA 定量结果。然而,不同品牌缓冲液成分和浓度有差异,可能对检测结果产生潜在影响。某些缓冲液中特殊添加剂,可能与试剂盒检测试剂相互作用,干扰荧光染料与 dsDNA 结合,导致检测结果偏差。
标准品方面,试剂盒虽自带标准品,但特殊实验需求下,若考虑用其他品牌标准品,同样需预先验证。不同品牌标准品纯度、稳定性及与检测试剂反应活性可能不同,会影响标准曲线准确性,进而干扰样本 dsDNA 含量计算。比如用其他品牌 dsDNA 模拟物作标准品,其与试剂盒中荧光染料结合能力,可能与试剂盒自带标准品有差异,导致标准曲线斜率变化。因此,将 Gquant 1X dsDNA BR Assay Kit 与其他品牌相关试剂搭配使用前,务必全面开展预实验,对比不同试剂组合检测结果,重点观察标准曲线线性关系、检测结果准确性和重复性等关键指标,根据实验结果综合判断能否兼容使用,避免因试剂不兼容致实验失败,浪费时间和资源。


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