GeticoFect RNAiMax Transfection Reagent

GeticoFect™ RNAiMAX 是一款拥有专有技术且经过精心优化的 RNAi 特异性纳米制剂。纳米技术的应用为这款试剂赋予了独特的优势。纳米颗粒具有微小的尺寸和巨大的比表面积,能够与 siRNA 或者 miRNA 形成稳定而高效的复合物。这种复合物就像是一个精密的运输载体,能够保护 RNAi 分子免受细胞内核酸酶的降解,确保其在细胞内保持活性。同时,纳米颗粒的特殊性质使其能够更好地与细胞膜相互作用,如同精准的导航一般,将 siRNA 或者 miRNA 准确无误地传递到多种细胞类型内部,为基因敲除实验奠定了坚实的基础。

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产品介绍


在当今蓬勃发展的生命科学研究领域,基因功能的深入探究是解锁众多生物学奥秘的关键所在。而 siRNA 介导的基因敲除实验,作为一种强大的研究工具,能够特异性地沉默目标基因,从而帮助科研人员揭示基因在生物过程中的具体作用。在这一重要实验中,一款高效的转染试剂无疑是取得成功的核心要素。GeticoFect™ RNAiMAX 转染试剂应运而生,它宛如一把精准的钥匙,为广泛的细胞类型提供了高效的转染效率,助力科研人员在基因敲除实验中取得理想成果。


一、独特的纳米制剂,精准传递 RNAi


GeticoFect™ RNAiMAX 是一款拥有专有技术且经过精心优化的 RNAi 特异性纳米制剂。纳米技术的应用为这款试剂赋予了独特的优势。纳米颗粒具有微小的尺寸和巨大的比表面积,能够与 siRNA 或者 miRNA 形成稳定而高效的复合物。这种复合物就像是一个精密的运输载体,能够保护 RNAi 分子免受细胞内核酸酶的降解,确保其在细胞内保持活性。同时,纳米颗粒的特殊性质使其能够更好地与细胞膜相互作用,如同精准的导航一般,将 siRNA 或者 miRNA 准确无误地传递到多种细胞类型内部,为基因敲除实验奠定了坚实的基础。


二、对比其他产品的显著优势


(一)高效转染与低浓度需求


GeticoFect™ RNAiMAX 转染试剂展现出了卓越的转染效率。在进行 siRNA 介导的基因敲除实验时,它仅需要较低的 RNAi 浓度,就能实现更有效的基因敲除效果。这是因为该试剂的纳米制剂能够更高效地将 siRNA 递送至细胞内,使得 siRNA 能够充分发挥其沉默基因的作用。较低的 RNAi 浓度不仅可以降低实验成本,还能减少非特异性作用的发生。非特异性作用可能会干扰实验结果,导致对基因功能的错误判断。而 GeticoFect™ RNAiMAX 转染试剂在保证高效基因敲除的同时,将非特异性作用控制在极小的范围内,为实验结果的准确性提供了有力保障。此外,该试剂还同时适用于 miRNA 转染,为科研人员在 miRNA 功能研究方面提供了便利。


(二)极低的细胞毒性


细胞毒性是评价转染试剂性能的重要指标之一。GeticoFect™ RNAiMAX 转染试剂在设计过程中充分考虑了对细胞的影响,通过优化纳米制剂的配方和制备工艺,将细胞毒性降至极低水平。在转染过程中,试剂与细胞的相互作用温和,不会对细胞的正常生理功能产生明显干扰。细胞能够在转染后保持较高的活性和增殖能力,这对于需要长期观察和分析的基因敲除实验尤为重要。例如,在一些研究细胞信号通路的实验中,如果转染试剂的细胞毒性过高,可能会导致细胞死亡或功能异常,从而影响实验结果的准确性和可靠性。而 GeticoFect™ RNAiMAX 转染试剂则能够避免这些问题的发生,确保实验的顺利进行。


(三)广泛的细胞适用性


GeticoFect™ RNAiMAX 转染试剂具有广泛的细胞适用性,适用于数百种细胞类型。无论是常见的细胞系,如 HEK293、HeLa 等,还是一些难以转染的细胞,如原代细胞、干细胞等,该试剂都能实现高效转染。这种广泛的适用性为科研人员提供了一个通用的转染方法,使得他们在进行不同类型细胞的基因沉默实验时,无需为选择合适的转染试剂而烦恼。无论是在基础研究中探索基因的功能,还是在药物研发中筛选潜在的治疗靶点,GeticoFect™ RNAiMAX 转染试剂都能发挥重要作用,为科研工作带来了极大的便利。


(四)简单的实验操作流程


实验操作的简便性对于科研工作的效率至关重要。GeticoFect™ RNAiMAX 转染试剂具有简单的实验操作流程,科研人员只需将该试剂与 siRNA 按照一定的比例混合,然后添加到细胞中,经过适当的孵育时间后,即可进行基因敲除效果的检测。整个过程无需复杂的技术和繁琐的步骤,降低了实验的难度和门槛,使得更多的科研人员能够轻松上手。这种简单、快速的操作方式与高转染效率相结合,使得 GeticoFect™ RNAiMAX 转染试剂成为高效 siRNA 转染的理想选择。


三、高效转染,实现高水平基因敲除


GeticoFect™ RNAiMAX 转染试剂可转染多种细胞类型,在基因沉默实验中表现出色。其高效的转染能力能够确保 siRNA 被大量、准确地导入细胞内,从而产生高水平的基因敲除效果。科研人员通过使用该试剂,能够获得令人满意的实验结果,清晰地观察到目标基因沉默后细胞所发生的变化。例如,在研究某种疾病相关基因的功能时,通过使用 GeticoFect™ RNAiMAX 转染试剂进行基因敲除实验,可以准确地了解该基因在疾病发生发展过程中的作用,为疾病的诊断和治疗提供理论依据。


只需将 GeticoFect™ RNAiMAX 转染试剂与 siRNA 混合,添加到细胞中,经过适当的孵育时间,就可以检测基因敲除的效果。这种简单的操作方式不仅节省了时间和精力,还提高了实验的可重复性。科研人员可以在不同的实验批次中获得相似的结果,确保了实验数据的可靠性和科学性。


综上所述,GeticoFect™ RNAiMAX 转染试剂凭借其独特的纳米制剂、显著的优势和高效的转染能力,为科研人员在 siRNA 介导的基因敲除实验中提供了一个强大而可靠的工具。无论是在基础研究还是应用研究中,它都将发挥重要作用,推动生命科学研究的不断发展。


1. 问:GeticoFect™ RNAiMAX 转染试剂的核心设计目标是什么?与通用转染试剂相比有何针对性优化?

答:该试剂专为 RNAi(RNA 干扰)实验设计,核心目标是高效递送 siRNA、miRNA、shRNA 等小 RNA 分子。相比通用转染试剂,其优化体现在三方面:一是采用小 RNA 靶向结合的阳离子脂质配方,与 siRNA 的结合效率比通用试剂高 30% 以上,减少非特异性吸附;二是脂质体粒径更小(约 50-80nm),更易通过内吞作用进入细胞,尤其适合小 RNA 的胞内递送;三是添加 RNA 酶抑制剂成分,可保护小 RNA 在转染过程中不被降解,提高稳定性。


2. 问:使用 GeticoFect™ RNAiMAX 转染 siRNA 时,推荐的 siRNA 与试剂比例是多少?如何根据细胞类型调整?

答:常规推荐 siRNA(pmol)与试剂(μL)的比例为 1:0.5-1:2。易转染细胞(如 HEK293、HeLa)可采用 1:0.5-1:1,例如 50pmol siRNA 对应 0.25-0.5μL 试剂;难转染细胞(如原代成纤维细胞、神经细胞)建议 1:1.5-1:2,如 50pmol siRNA 对应 0.75-1μL 试剂。调整时可设置 3-5 个比例梯度(如 1:0.5、1:1、1:1.5、1:2),通过 qPCR 检测靶基因沉默效率(以沉默率 > 70% 且细胞毒性最低为最佳)。


3. 问:转染过程中能否使用含血清的培养基?是否需要更换无血清培养基?

答:可以直接在含血清的培养基中进行转染,无需更换无血清培养基。GeticoFect™ RNAiMAX 的脂质配方对血清耐受性强,血清中的蛋白成分不会显著影响 siRNA - 试剂复合物的形成和细胞摄取。操作时可直接用完全培养基(含 10%-20% 血清)稀释 siRNA 和试剂,简化流程的同时减少细胞因换液导致的应激反应。


4. 问:转染后多久能观察到基因沉默效果?效果能持续多长时间?

答:基因沉默效果出现时间因细胞类型而异:多数贴壁细胞在转染后 24-48 小时可检测到靶基因 mRNA 水平下降,48-72 小时达到沉默高峰(沉默率通常 > 70%);悬浮细胞(如 Jurkat)可能稍早,24 小时左右即可观察到明显效果。效果持续时间一般为 5-7 天,部分增殖缓慢的细胞(如原代细胞)可延长至 10 天以上。若需长期沉默,建议在第 5 天进行二次转染。


5. 问:转染后细胞出现毒性(如皱缩、脱落),可能的原因是什么?如何解决?

答:可能原因及解决办法:一是试剂比例过高,可降低比例(如从 1:2 降至 1:1),减少细胞摄取量;二是 siRNA 浓度过高,建议将 siRNA 终浓度控制在 10-100nM,避免非特异性效应;三是细胞密度过低,转染时贴壁细胞融合度应保持在 50%-70%(比 DNA 转染低),悬浮细胞密度不低于 1×10个 /mL;四是转染后未及时补充营养,可在 24 小时更换新鲜培养基,缓解细胞压力。


6. 问:能否用 GeticoFect™ RNAiMAX 共转染 siRNA 和 mRNA?操作上有哪些注意事项?

答:可以共转染。注意事项:一是分别优化比例,siRNA 与试剂比例 1:1,mRNA 与试剂比例 1:1.5,混合后总试剂用量为两者之和;二是先将 siRNA 和 mRNA 混合稀释,再加入稀释后的试剂,避免分别结合导致的竞争;三是共转染后检测时间提前至 24-48 小时(因 mRNA 表达更快),通过 qPCR 和 Western blot 分别验证沉默效果和 mRNA 表达;四是总核酸浓度不宜过高,每孔(24 孔板)siRNA+mRNA 总量不超过 1μg,避免增加细胞毒性。


7. 问:该试剂对哪些难转染细胞的 RNAi 实验有验证效果?沉默效率如何?

答:已验证对多种难转染细胞有效:原代大鼠肝细胞转染 siRNA 后,靶基因沉默效率可达 60%-70%;人脐静脉内皮细胞(HUVEC)沉默效率约 55%-65%;小鼠巨噬细胞(RAW264.7)约 50%-60%;神经干细胞约 40%-50%。对悬浮细胞如 Jurkat T 细胞,优化后沉默效率可达 45%-55%(需采用 1:1.5 比例,转染时细胞密度 2×10个 /mL)。


8. 问:转染 siRNA 后,如何区分是特异性沉默还是脱靶效应?GeticoFect™ RNAiMAX 是否会加重脱靶效应?

答:区分方法:一是设置阴性对照(如非靶向 siRNA),若阴性对照组也出现类似表型,可能为脱靶效应;二是检测靶基因的同源基因或无关基因表达,脱靶效应常导致非特异性下调;三是使用 2-3 条不同序列的 siRNA 靶向同一基因,若均产生一致表型,特异性更高。该试剂不会加重脱靶效应,其配方可减少 siRNA 的非特异性结合,脱靶率比通用试剂低 15%-20%,但仍建议通过上述方法验证特异性。


9. 问:试剂的储存和使用有哪些特殊要求?开封后能保存多久?

答:储存要求:需在 4℃避光保存,严禁冷冻(冷冻会破坏脂质体结构),未开封保质期 2 年。开封后需密封保存,避免反复暴露于室温,建议 3 个月内使用完毕。使用前需轻轻颠倒混匀(不可涡旋),若发现轻微浑浊属正常现象,不影响使用;若出现沉淀或分层,可能已失效,建议更换。


10. 问:进行高通量 RNAi 筛选(如 96 孔板)时,使用 GeticoFect™ RNAiMAX 需要注意什么?

答:注意事项:一是采用反向转染,先将 siRNA 和试剂加入孔板,再接种细胞,减少操作时间差异;二是优化每孔用量,96 孔板每孔 siRNA 10-20pmol,试剂 0.1-0.2μL,用无血清培养基稀释至 10μL,避免体积过小导致混合不均;三是复合物制备后 15 分钟内完成接种,确保活性;四是使用多通道移液器精准加样,控制孔间 CV 值 < 10%;五是转染后 48 小时检测,此时沉默效率最高且细胞状态稳定,适合高通量数据分析。

 


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